【摘 要】
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目的 探讨5-脱氧杂氮胞苷(5-Aza-Cda)对肝癌细胞分泌exosomes及其负载的肿瘤相关抗原和免疫相关分子含量的影响.方法 采用离心超滤联合蔗糖密度梯度离心方法,分离和纯化经5-A
【机 构】
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解放军总医院第一附属医院肿瘤科,内蒙古医学院组织胚胎教研室
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目的 探讨5-脱氧杂氮胞苷(5-Aza-Cda)对肝癌细胞分泌exosomes及其负载的肿瘤相关抗原和免疫相关分子含量的影响.方法 采用离心超滤联合蔗糖密度梯度离心方法,分离和纯化经5-Aza-CdR处理和未处理的HepG2和Hep3B肝癌细胞释放的exosomes,并对exosomes进行计数和蛋白定量测定.采用免疫电镜和Western blot技术,观察exosomes表达HSP70、HLA-Ⅰ和NY-ESO-1蛋白的变化;以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测5-Aza-CdR处理前后HepG2和Hep3B细胞野生型p53基因mRNA的表达.结果 经5-Aza-CdR处理后,HepG2和Hep3B细胞p53基因mRNA表达较未处理组均明显增加,exosomes数量和蛋白含量均较未处理组显著增加(P
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