“摇晃法”对成骨细胞定量加载流体剪切应力的可行性研究

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可靠的流体剪切应力加载系统是研究细胞生物力学特性的重要基础。虽然传统的平行平板流动室(PPFC)系统已经较为成熟,但是它存在操作复杂、加工价格较贵、处理细胞的数量不足等缺点。针对这些缺点,Zhou等提出了一种新的"摇晃式"加载系统,但是这一系统的可行性仍未得到实践证明。为了验证使用该系统对细胞加载定量的流体剪切应力的可行性,本研究分别使用摇晃法和传统的平板PPFC法对原代成骨细胞加载平均大小约7dyne/cm2的流体剪切应力,另设一组不加载的细胞作为空白对照组。通过激光共聚焦显微镜检测各组细胞的细胞骨架重建情况并记录聚合态肌动蛋白(F-actin)的平均荧光密度;通过流式细胞仪检测各组细胞的增殖情况,记录S期细胞的百分比。最后对所得到的结果进行成组t检验分析。实验结果表明:与空白对照组(20.4±1.8)相比,使用"摇晃法"加载成骨细胞后,F-actin的平均荧光密度增高(46.8±4.5)。S期细胞的百分比(10.6±1.04)%较对照组(4.1±0.54)%也有明显的升高。通过细胞骨架重建和细胞周期的分析,发现"摇晃法"产生的流体剪切应力的生物学效应高于PPFC法。这一结果证明了"摇晃法"产生的流体剪切应力同样可以诱导成骨细胞的生物力学活性,而且它比PPFC法更好的模拟了体内细胞的应力微环境,是一种简便可行的流体剪切应力加载方法。
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