【摘 要】
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本研究构建真核表达载体pEGFP—BMI-1并观察其在HeLa细胞中的表达。将BMI-1逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）产物克隆入pEGFP—N1，经酶切、PCR鉴定及测序分析，构建pEGFP—BMI-1真核表
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科
【基金项目】
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湖北省科技攻关项目,编号2005AA304B08
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本研究构建真核表达载体pEGFP—BMI-1并观察其在HeLa细胞中的表达。将BMI-1逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）产物克隆入pEGFP—N1，经酶切、PCR鉴定及测序分析，构建pEGFP—BMI-1真核表达载体；采用脂质体转染法，将融合基因pEGFP-BMI-1转入HeLa细胞，用荧光显微镜和Western blot检测其表达，SYBR GreenⅠ实时定量RT—PCR方法检测转染前后HeLa细胞中P16^INK4a mRNA的表达变化。结果表明：重组后的pEGFP-N1质粒已成功载入BMI-1的
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