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背景:神经生长因子在体外、体内稳定性差,容易导致其失去生物活性。目的:观察注射用脂质体包裹的神经生长因子在不同条件下储存的稳定性。设计:以脂质体包裹的神经生长因子为观察对象的对照实验。单位:南京医科大学第一附属医院外科。材料:实验于2002-07/2004-03在南京医科大学第一附属医院中心实验室完成。将纯化得到的小鼠颌下腺的神经生长因子用脂质体包裹后分别制成冻干剂型,按照以下4组条件分组:①4℃放置。②室温放置。③40℃放置。④40℃+饱和湿度放置。方法:①采用无血清鸡胚背根神经节法测定体外神经生长因子活性。取8日龄鸡胚背根神经节接种于涂有多聚赖氨酸的24孔培养板上,分别加入含有不同浓度的待测样品的Dulbecco’s的改良的Eagle’s培养基,阴性对照加入相同体积的Dulbecco’s的改良的Eagle’s培养基,阳性对照加入含有不同浓度神经生长因子的Dulbecco’s的改良的Eagle’s培养基,在37℃,50mL/L二氧化碳,饱和湿度的培养箱中培养24h,在倒置显微镜下观察神经纤维的生长情况。②模拟体内环境下测定神经生长因子生物稳定性:分别取神经生长因子冻干脂质体和神经生长因子阳性对照品加入0.5mL小鼠血浆,将上述血浆样品和空白血浆于0.5,1,2,3,4,6h加入Dulbecco’s的改良的Eagle’s培养基2.5mL混合均匀。生物学活性判断标准:根据背根神经节神经纤维的生长长度和密度将其分为4种情况:①无突起生长为“-”为阴性对照。②少量突起生长“+”。③突起较长较密据其程度判为“”或“”。④突起生长最长最密为“”。统计学分析由南京医科大学统计学教研室采用系统分组(嵌套)设计资料行方差分析。主要结局观察:采用无血清鸡胚背根神经节法测定:①10,30,60,90d体外神经生长因子的活性。②0,0.5,1,2,3,4,6h体内神经生长因子的活性。结果:①神经生长因子脂质体冻干粉针体外生物稳定性的长期实验结果:在4℃、室温条件下放置10～90d生物活性稳定();在40℃条件下放置10～60d生物活性稳定(),放置90d生物活性轻微下降();在40℃+饱和湿度条件下放置10d生物活性稳定(),放置30～60d生物活性轻微下降(),放置90d生物活性降低(+)。②模拟体内环境下神经生长因子脂质体冻干粉针生物稳定性的实验结果:在0,0.5,1,2,3h生物活性稳定(或),在4,6h生物活性轻微下降()。结论:脂质体包裹的神经生长因子是稳定的,较高的温度和湿度不利于储存。神经生长因子冻干脂质体在不同贮存条件下的生物学稳定性均优于神经生长因子脂质体混悬液。