LC3Ⅱ在高浓度氧致肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡中的作用

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目的

探讨微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)在高浓度氧诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡中的作用。

方法

将A549细胞以1×105个/ml的密度接种于6孔培养板(0.5 ml/孔)中,当细胞生长至80%融合时,采用随机数字表法,将其分为3组(n=12):对照组(C组)、95%氧气组(95%O2组)和95%氧气+ 3-甲基腺嘌呤组(95%O2+3-MA组)。C组细胞放入常规培养箱(95%空气-5%O2)中培养,95%O2组和95%O2+3-MA组细胞放入95%氧气-5%CO2的密闭容器中培养。95%O2+3-MA组每孔加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤5 mmol/L,然后置于高氧密闭容器中进行培养。至培养24 h时,每组取6孔,采用Western blot法测定LC3Ⅱ和caspase-3的表达水平;每组取6孔,采用台盼蓝染色法确定细胞死亡率。

结果

与C组比较,95%O2组和95%O2+3-MA组LC3Ⅱ和caspase-3表达上调,细胞死亡率增加(P<0.05);与95%O2组比较,95%O2+3-MA组LC3Ⅱ表达下调,caspase-3表达上调,细胞死亡率增加(P<0.05)。

结论

LC3Ⅱ表达上调可抑制高浓度氧致肺泡Ⅱ型上皮细胞早期凋亡。

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