【摘 要】
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目的 观察胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)角化细胞生长因子受体(KGFR)在高氧暴露过程中表达的变化及其与P53关系的研究.方法 原代培养的胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,随机分为高氧组,高氧+ Pifithrin组和对照组.流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平的变化,Realtime PCR检测KGFRmRNA的表达,Western Blot检测细胞KGFR,P53,P-P53(ser392)蛋白的
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科,湖北 武汉 430030
【出 处】
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庆祝中国当代儿科杂志创刊15周年大会暨当代儿科论坛
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目的 观察胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)角化细胞生长因子受体(KGFR)在高氧暴露过程中表达的变化及其与P53关系的研究.方法 原代培养的胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,随机分为高氧组,高氧+ Pifithrin组和对照组.流式细胞仪检测细胞内活性氧簇(ROS)水平的变化,Realtime PCR检测KGFRmRNA的表达,Western Blot检测细胞KGFR,P53,P-P53(ser392)蛋白的表达.结果 (1)随着高氧干预时间的延长,肺泡Ⅱ型上皮细胞ROS值逐渐升高[(165.86±5.290) ～(920.86±2.896),(P＜0.01)],8h时达极点；(2)与对照组比较,高氧1h时,胎鼠AECⅡKGFRmRNA的表达即明显下降,4h时达极点.高氧1h和4h时,其表达量分别为对照组的0.89倍和0.45倍(P＜0.01).(3) Western blot结果显示：与对照组比较,高氧4h时,胎鼠AECⅡ KGFR蛋白的表达即明显下降,12 h时达极点,以后下降趋势逐渐减弱,高氧4、8、12、24和48 h时,其下降幅度分别为1.3、1.6、1.9、1.3和1.2倍(P＜0.01).高氧4、8、和12 h时,高氧组P-P53(ser392)蛋白的表达均明显高于同时间点对照组(P＜0.01).并且在4h时达到高峰,然后随时间的延长表达逐渐下降；与高氧组比较,高氧+ Pifithrin组P-P53 (ser392)蛋白的表达明显下降(P＜0.01),KGFR蛋白的表达得以恢复(P＜0.01).结论 高氧通过激活P53从而抑制AECⅡKGFR的表达.
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