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【摘 要】本实验对高效液相色谱测定婴儿配方食品中低聚半乳糖的方法进行研究,使用β半乳糖甘酶对低聚半乳糖进行酶解,通过HPLC测量酶解前后乳糖及半乳糖的质量差来计算样品中低聚半乳糖的总含量。
【关键词】高效液相色谱;β半乳糖甘酶;低聚半乳糖
1、引言
低聚半乳糖是一类可溶性食用纤维素,是1-7个半乳糖残基与葡萄糖或乳糖的还原端相连的低聚糖。低聚半乳糖的α糖甘键中含有β折叠,小肠中的β半乳糖甘酶可以消化α糖甘键,但是β半乳糖甘酶经常缺失或其活性受到抑制。
2、实验方法
2.1 样品的前处理
2.4 数据处理
3、结果分析
3.1 萃取时磷酸缓冲溶液用量对低聚半乳糖加标回收率的影响
本实验通过对加标回收率的测量,对前处理方法中低聚半乳糖萃取时磷酸缓冲溶液用量进行了优化。前处理其他条件设为:加酶量1.0ml,酶解温度为60℃,酶解时间为30min。由表3-1可以看出,磷酸缓冲溶液用量小于40ml时,低聚半乳糖加标回收率随着磷酸缓冲溶液用量的增加而显著增加,其中磷酸缓冲溶液使用量为40ml时低聚半乳糖的加标回收率最高。
4、结论
本实验使用单因素分析法对HPLC检测婴儿配方食品中低聚半乳糖的方法进行研究,使用β半乳糖甘酶对低聚半乳糖进行酶解,通过使用HPLC测量酶解前后乳糖及半乳糖的质量差来计算样品中低聚半乳糖的总含量。本实验对前处理中的磷酸缓冲溶液用量,加酶量,酶解时间和酶解温度进行优化,其最佳前处理条件为:萃取时磷酸缓冲溶液用量为40ml,加酶量为1.0ml,酶解时间为30min,酶解温度为60℃,其加标回收率达到82.40%。
【关键词】高效液相色谱;β半乳糖甘酶;低聚半乳糖
1、引言
低聚半乳糖是一类可溶性食用纤维素,是1-7个半乳糖残基与葡萄糖或乳糖的还原端相连的低聚糖。低聚半乳糖的α糖甘键中含有β折叠,小肠中的β半乳糖甘酶可以消化α糖甘键,但是β半乳糖甘酶经常缺失或其活性受到抑制。
2、实验方法
2.1 样品的前处理
2.4 数据处理
3、结果分析
3.1 萃取时磷酸缓冲溶液用量对低聚半乳糖加标回收率的影响
本实验通过对加标回收率的测量,对前处理方法中低聚半乳糖萃取时磷酸缓冲溶液用量进行了优化。前处理其他条件设为:加酶量1.0ml,酶解温度为60℃,酶解时间为30min。由表3-1可以看出,磷酸缓冲溶液用量小于40ml时,低聚半乳糖加标回收率随着磷酸缓冲溶液用量的增加而显著增加,其中磷酸缓冲溶液使用量为40ml时低聚半乳糖的加标回收率最高。
4、结论
本实验使用单因素分析法对HPLC检测婴儿配方食品中低聚半乳糖的方法进行研究,使用β半乳糖甘酶对低聚半乳糖进行酶解,通过使用HPLC测量酶解前后乳糖及半乳糖的质量差来计算样品中低聚半乳糖的总含量。本实验对前处理中的磷酸缓冲溶液用量,加酶量,酶解时间和酶解温度进行优化,其最佳前处理条件为:萃取时磷酸缓冲溶液用量为40ml,加酶量为1.0ml,酶解时间为30min,酶解温度为60℃,其加标回收率达到82.40%。