【摘 要】
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目的 探讨甲状腺激素对巨噬细胞毒性、泡沫化、极化和迁移功能的调控作用.方法 采用CCK-8比色法测定RAW 264.7小鼠巨噬细胞活性;采用流式细胞术检测甲状腺激素对巨噬细胞凋亡的影响;使用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞泡沫化,用油红O染色法检测甲状腺激素对巨噬细胞泡沫化的影响;使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测甲状腺激素对RAW 264.7小鼠巨噬细胞M1型和M2型极化的影响;采用划痕实验检测甲状腺激素对小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)迁移能力的影响.结果 CCK-8比色法和流
【机 构】
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100037北京市 中国医学科学院北京协和医学院阜外医院心血管疾病国家重点实验室
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目的 探讨甲状腺激素对巨噬细胞毒性、泡沫化、极化和迁移功能的调控作用.方法 采用CCK-8比色法测定RAW 264.7小鼠巨噬细胞活性;采用流式细胞术检测甲状腺激素对巨噬细胞凋亡的影响;使用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导巨噬细胞泡沫化,用油红O染色法检测甲状腺激素对巨噬细胞泡沫化的影响;使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测甲状腺激素对RAW 264.7小鼠巨噬细胞M1型和M2型极化的影响;采用划痕实验检测甲状腺激素对小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)迁移能力的影响.结果 CCK-8比色法和流式细胞术结果提示,与对照组相比,甲状腺激素在基础状态下可以减少巨噬细胞凋亡和坏死,增强巨噬细胞的活性;油红O染色结果提示,与对照组相比,甲状腺激素可以促进巨噬细胞泡沫化,且具有剂量依赖性,甲状腺激素浓度越高,巨噬细胞泡沫化程度越高;RT-qPCR结果提示,与对照组相比,甲状腺激素可以促进巨噬细胞向M1型极化,抑制巨噬细胞向M2型极化;与对照组相比,甲状腺激素能够促进脂多糖(LPS)和γ干扰素(IFN-γ)诱导的M1型巨噬细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)(P＜ 0.01)和M1型极化标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、细胞色素C氧化酶亚基Ⅱ(COX-2)的表达(P＜0.05),同时抑制白细胞介素-4(IL-4)诱导的M2型巨噬细胞标志物CD206的表达(P＜0.05);划痕实验结果显示,甲状腺激素可以促进巨噬细胞迁移.结论 甲状腺激素可以促进巨噬细胞向M1型极化,抑制其向M2型极化.而且甲状腺激素可以减少基础状态下巨噬细胞的凋亡和坏死,能够增强巨噬细胞的活性,增强巨噬细胞泡沫化,促进巨噬细胞迁移.
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