【摘 要】
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目的:建立超高相液相色谱-生物化学检测(UPLC-BCD)分析方法快速筛选丹参、远志、蕲艾药材中凝血酶抑制剂,为中草药中生物活性成分的辨识提供一种便捷的技术手段.方法:运用UPLC分析技术,采用Xtimate UHPLCC18色谱柱(2.1mm×100 mm,1.8μm),柱温30℃,流动相为甲醇(B)-0.1％甲酸水溶液(A),梯度洗脱,检测波长256 nm,体积流量0.2 mL· min-1.以比伐卢定作为阳性对照,考察酶反应条件,建立UPLC-BCD分析方法检测3种药材提取物与凝血酶反应前后色谱特征
【机 构】
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襄阳市公共检验检测中心技术与产业发展科,湖北襄阳441104;湖北文理学院附属医院,襄阳市中心医院,白癜风特色制剂襄阳市重点实验室,湖北襄阳441021
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目的:建立超高相液相色谱-生物化学检测(UPLC-BCD)分析方法快速筛选丹参、远志、蕲艾药材中凝血酶抑制剂,为中草药中生物活性成分的辨识提供一种便捷的技术手段.方法:运用UPLC分析技术,采用Xtimate UHPLCC18色谱柱(2.1mm×100 mm,1.8μm),柱温30℃,流动相为甲醇(B)-0.1％甲酸水溶液(A),梯度洗脱,检测波长256 nm,体积流量0.2 mL· min-1.以比伐卢定作为阳性对照,考察酶反应条件,建立UPLC-BCD分析方法检测3种药材提取物与凝血酶反应前后色谱特征图谱及酶反应产物的差异,评价3种药材凝血酶抑制作用、快速筛选所含酶抑制剂,采用超高效液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱(UHPLC-LTQ/Orbitrap MS)方法鉴定酶抑成分.结果:丹参、远志和蕲艾均具有较好的凝血酶抑制作用,检出丹参和远志中7种酶抑制剂,初步鉴定为丹酚酸A、迷迭香酸、丹酚酸B、西伯利亚远志咕吨酮B、远志山酮Ⅲ、3,6\'-二芥子酰基蔗糖、细叶远志苷A.蕲艾色谱峰在反应前后无明显变化,其酶抑制活性可能来源于色谱图未显示的其他成分.结论:建立的UPLC-BCD方法能够快速辨别复杂基质的酶抑制作用及酶抑制剂,为中草药中生物活性成分的快速筛选提供了快速、便捷的分析手段.
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