【摘 要】
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目的探讨乙醇对肝癌细胞凋亡的诱导作用及其与凋亡相关基因bax和bcl-2表达的关系。方法用噻唑蓝(MTT)法检测浓度分别为20～100 mL/ L的乙醇对肝癌细胞系HCC-9204的杀伤作用。然
【机 构】
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第四军医大学病理学教研室!陕西西安710032,第四军医大学病理学教研室!陕西西安710032,上海第二医科大学第九人民医院口腔医学研究所!上海200011
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目的探讨乙醇对肝癌细胞凋亡的诱导作用及其与凋亡相关基因bax和bcl-2表达的关系。方法用噻唑蓝(MTT)法检测浓度分别为20～100 mL/ L的乙醇对肝癌细胞系HCC-9204的杀伤作用。然后，用60 mL/ L乙醇作用6 h诱导HCC-9204细胞凋亡。以May-Grunwald-Giemsa (MGG)染色法、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法和流式细胞术分别分析凋亡细胞的形态学变化、DNA断裂情况和不同细胞周期的DNA含量变化。用免疫细胞化学染色图象分析法，检测诱导凋亡前、后Bax和Bcl-2蛋白表达水平的变化。结果随着乙醇浓度的增加，其对HCC-9204细胞的杀伤作用逐渐增强。60 mL/ L乙醇可使HCC-9204细胞发生明显的细胞凋亡的形态学变化，并且大部分细胞为TUNEL阳性着色。流式细胞术分析可见明显的亚二倍体凋亡峰。诱导凋亡后的HCC-9204细胞Bax蛋白的表达水平明显增高，而Bcl-2在诱导凋亡前、后的HCC-9204细胞中均未见表达。结论低浓度乙醇对肝癌细胞HCC-9204具有明显的凋亡诱导作用，其凋亡的发生与Bax蛋白表达水平的增高有关。
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