【摘 要】
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目的 探讨丝裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶4(MAP4K4)对膀胱癌细胞株T24增殖、侵袭和凋亡的影响. 方法 采用基因芯片技术对2010年6月至201 1年6月5对肌层浸润性膀胱癌及癌旁组织的基凶表达谱进行初步研究,对比癌和癌旁组织的差异基因表达,筛选与膀胱癌发生、发展相关基因.结合文献检索,筛选出 MAP4K4作为研究基因,并采用PCR和蛋白质印迹法从转录和翻译水平检测16对肌层浸润性膀胱癌及癌
【机 构】
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300211天津医科大学第二医院泌尿外科天津市泌尿外科研究所,300211天津医科大学第二医院泌尿外科天津市泌尿外科研究所,300211天津医科大学第二医院泌尿外科天津市泌尿外科研究所,300211天
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目的 探讨丝裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶4(MAP4K4)对膀胱癌细胞株T24增殖、侵袭和凋亡的影响. 方法 采用基因芯片技术对2010年6月至201 1年6月5对肌层浸润性膀胱癌及癌旁组织的基凶表达谱进行初步研究,对比癌和癌旁组织的差异基因表达,筛选与膀胱癌发生、发展相关基因.结合文献检索,筛选出 MAP4K4作为研究基因,并采用PCR和蛋白质印迹法从转录和翻译水平检测16对肌层浸润性膀胱癌及癌旁组织中MAP4K4的表达情况,验证基因芯片的结果.然后设计一个空载体质粒(对照组)及MAP4K4靶向短发夹RNA (shRNA)核苷酸序列质粒(靶向干扰组)分别转染T24细胞,嘌呤霉素筛选稳定转染细胞,qRT-PCR和蛋白质印迹法检测靶基因干扰效率,并对转染后T24细胞进行MTT细胞增殖实验、Transwell细胞侵袭实验及Annexin-V法细胞凋亡检测. 结果 膀胱癌组织中MAP4K4表达高于癌旁组织(P=0.020).MAP4K4基因沉默后细胞增殖减慢(靶向干扰组与对照组,P＜0.001).靶向干扰组与对照组穿膜细胞分别为5.40±2.07和17.00±2.74(P=0.004),细胞凋亡比例分别为(15.72±6.40)％和(4.23±3.29)％(P=0.023),组间比较差异均有统计学意义. 结论 MAP4K4在膀胱癌中相对于正常组织高表达,降低MAP4K4基因表达可以抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭,促进细胞凋亡.MAP4K4有望成为膀胱癌治疗的新靶点。
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