circRNA_100395通过结合miR-31-5p抑制心肌细胞肥大相关基因的表达

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 4次 | 上传用户:jedy2008
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目的:探讨环状RNA(circRNA)100395对心肌细胞肥大表型的影响及其作用机制。方法:通过RT-qPCR检测健康器官捐献者(n=8)与心衰患者(n=14)心肌组织中circRNA100395及其宿主基因Kelch蛋白样家族成员20(KLHL20)的表达水平。原代分离、培养乳小鼠心室肌细胞(NMVCs),分别感染对照病毒(rAd-GFP)和circRNA100395重组腺病毒(rAd-circRNA100395)24 h,探究circRNA100395对心肌肥大相关的β-肌球蛋白重链(β-MHC)、骨骼肌α-肌动蛋白(ACTA1)及心房钠尿肽(ANP)表达的影响。采用鬼笔环肽染色检测circRNA100395对血管紧张素II(Ang II)处理的NMVCs肥大反应的影响。通过双萤光素酶报告基因实验及RNA pull-down实验验证微小RNA-31-5p(miR-31-5p)与circRNA100395的结合作用。通过转染miR-31-5p mimic至NMVCs中,检测miR-31-5p对circRNA100395抑制心肌肥大相关基因表达的影响。结果:在心衰患者心肌组织中,circRNA100395表达水平及其宿主基因KLHL20的mRNA表达水平显著增加(P<0.05)。过表达circRNA100395可以降低NMVCs中心肌肥大相关基因Myh7(编码β-MHC蛋白)、Acta1及Anp的表达,抑制Ang Ⅱ的促NMVCs肥大反应(P<0.01)。双萤光素酶报告基因实验和RNA pull-down实验结果表明miR-31-5p与circRNA100395存在相互结合作用。过表达miR-31-5p可减弱circRNA100395对心肌细胞肥大的抑制作用。结论:circRNA100395通过结合miR-31-5p发挥抑制心肌细胞肥大的作用。
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