【摘 要】
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目的探讨60Co γ射线照射对血管内皮细胞线粒体结构和功能的影响。方法分别采用60Co γ射线0（细胞对照组），5,10和20 Gy单次照射人脐静脉内皮细胞（HUVEC），照射后24和48 h，采用流式细胞术检测细胞凋亡；荧光探针H2DCF-DA标记，用激光共聚焦显微镜检测细胞产生活性氧（ROS）水平；JC-1探针标记，分别用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位；通过钙黄绿素-AM探针
【基金项目】
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国家自然科学基金（82173450）；
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目的探讨60Co γ射线照射对血管内皮细胞线粒体结构和功能的影响。方法分别采用60Co γ射线0（细胞对照组），5,10和20 Gy单次照射人脐静脉内皮细胞（HUVEC），照射后24和48 h，采用流式细胞术检测细胞凋亡；荧光探针H2DCF-DA标记，用激光共聚焦显微镜检测细胞产生活性氧（ROS）水平；JC-1探针标记，分别用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位；通过钙黄绿素-AM探针标记，激光共聚焦显微镜定性检测线粒体膜通道孔（mPTP）开放状态；电镜观察线粒体结构变化；Western印迹法检测线粒体分裂相关标志物磷酸化动力相关蛋白1（p-Drp1）和磷酸化线粒体分裂因子（p-Mff）蛋白表达水平。结果与细胞对照组相比，照射后24和48 h,5,10和20 Gy组细胞凋亡率增加（P＜0.01）;5 Gy组（P＜0.05）、10 Gy组（P＜0.01,P＜0.05）和20 Gy组（P＜0.01）细胞ROS水平增加；5 Gy组（P＜0.01,P＜0.05）、10 Gy组（P＜0.01）和20 Gy组（P＜0.01）细胞mPTP开放增加。流式细胞术和荧光显微镜检测结果显示，与细胞对照组相比，照射后24和48 h,5,10和20 Gy组线粒体膜电位下降（P＜0.01）。电镜观察显示，与细胞对照组相比，照射组照射后48 h，单个线粒体面积增加（P＜0.05,P＜0.01），单个线粒体周长增加（P＜0.05），线粒体密度下降（P＜0.05,P＜0.01），异常线粒体数量大幅增加（P＜0.01）。与细胞对照组相比，各照射组照射后48 h,p-Drp1和p-Mff蛋白表达水平均显著增加（P＜0.05,P＜0.01）。结论60Co γ射线照射加重血管内皮细胞线粒体损伤，促进线粒体分裂，诱发线粒体功能障碍。
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