构建预设CDR3基因噬菌体抗体库筛选抗人整合素ανβ3 mAb的人源化Fab

来源 :细胞与分子免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yr
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目的:构建预设CDR3基因的噬菌体抗体库, 通过抗原表位导向选择方法筛选抗人整合素ανβ3单克隆抗体(mAb)人源化Fab.方法:将鼠mAb LCDR3重组到人轻链可变区文库中并与人/鼠嵌合重链Fd基因配对构建杂合噬菌体抗体库, 用固相人整合素ανβ3抗原筛选人源化轻链基因.再用所获人轻链基因与移植有鼠mAb HCDR3的人重链Fd基因配对构建人源噬菌体抗体库, 筛选人源化Fab.结果:分别构建了库容为2.1×106和2×107的杂合噬菌体抗体库和人源噬菌体抗体库, 筛选到3株人源Fab克隆.经间接ELISA及竞争抑制ELISA证实, 能特异结合整合素ανβ3抗原, 其中人源D5株Fab克隆的基因序列表明, 人轻链可变区基因属VKIII亚群, 人重链可变区基因属VH1亚群.结论:利用噬菌体抗体库技术, 成功地进行了鼠抗人整合素ανβ3 mAb E10人源化的改造, 为进一步临床应用奠定了基础.
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