【摘 要】
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目的 探讨转录因子特殊富含AT序列结合蛋白2(special AT-rich binding protein 2,SATB2)在骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)成骨分化中的作用,以期为牙组织工程
【基金项目】
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2010年上海市科学技术委员会科研计划
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目的 探讨转录因子特殊富含AT序列结合蛋白2(special AT-rich binding protein 2,SATB2)在骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)成骨分化中的作用,以期为牙组织工程筛选种子细胞及调控因子提供实验依据.方法 采用密度梯度离心与贴壁培养相结合的方法,分离并鉴定BMSC;构建SATB2表达载体,转染BMSC,设立转染组(SATB2组)、转染空质粒组(Mock组)及未转染组(对照组),蛋白质印迹法及反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测SATB2蛋白及mRNA的表达,分析SATB2在成骨分化过程中对成骨因子(Runx2、Osx、Atf4及骨涎蛋白)表达的影响.结果 BMSC在体外分离培养后形态呈长梭形或多角形;流式细胞仪分析结果显示第3代BMSC细胞CD29呈阳性表达,CD34呈阴性表达;生长曲线呈S形.satb2基因成功转染至BMSC后,矿化结节明显增多,SATB2组IA值为125974±241,对照组IA值为178 486±406;且迁移速率提高,8 h时SATB2组划痕宽度为(0.72±0.01) mm,对照组为(0.83±0.03) mm.SATB2组Runx2、Osx、Atf 4及骨涎蛋白的表达与对照组相比均增高.结论 获得了均一性较好的牙组织工程种子细胞;明确了SATB2可有效诱导BMSC的成骨分化,为建立具有潜在临床应用价值的种植牙骨整合研究模型提供了实验依据.
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