【摘 要】
：
为快速鉴定Fusariumoxysporum f.sp.fragariae(Fof)引起的草莓枯萎病,主要采用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立了 Fof的快速检测体系,使用组织分离法和PCR法对LAMP 技术辅佐验证.结果表明:25 μL 体系中添加 Buffer 2.50 μL、Mg2+(100 mmol/L)0.25 μL、dNTPs(10 mmol/L)1.00 μL、FIP 和 BIP(20 μmol/L)各 1.00
【机 构】
：
中国农业大学园艺学院,北京100193
论文部分内容阅读
为快速鉴定Fusariumoxysporum f.sp.fragariae(Fof)引起的草莓枯萎病,主要采用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)建立了 Fof的快速检测体系,使用组织分离法和PCR法对LAMP 技术辅佐验证.结果表明:25 μL 体系中添加 Buffer 2.50 μL、Mg2+(100 mmol/L)0.25 μL、dNTPs(10 mmol/L)1.00 μL、FIP 和 BIP(20 μmol/L)各 1.00 μL、F3和 B3(10 μmol/L)各0.50μL、LoopF(10 μmol/L)0.75 μL、Bst DNA 聚合酶(8 U/μL)0.50 μL、Betaine(5 mol/L)1.00 μL、DNA 模板 1.00 μL 和 ddH2O 15.00 μL,反应结束后添加0.40 μL的SYBR Green I染料为最佳反应体系;该体系最适反应温度为62.9℃,最佳反应时间为60 min;特异性试验表明该体系能从16种草莓常见病原菌中特异性检测出Fof,最低检出限为45 pg/μL,比常规PCR检测效率高;随机抽取田间病害样品16株,采用LAMP体系检测罹病草莓根茎中的病原菌,其中12株感病草莓的病原菌为Fof,使用组织分离法和PCR法验证了 LAMP检测结果的准确性;传统病原菌鉴定耗时约5～7 d,而LAMP检测1 d内便可完成.综上,本研究建立的LAMP检测体系为Fof准确快速检测及实际应用奠定了基础.
其他文献
现如今,在我国畜牧业不断发展的背景下,羊肺线虫病率也越来越高.如果不对其进行有效防治,会引起羊群出现肺炎等疾病.在对网尾科线虫的特性进行分析后发现,其属于大型肺线虫,致病力较强.基于此,为了进一步促进畜牧业的健康发展,要加强对羊肺线虫病的有效防治.
中棉所135在四川省植棉区生育期132 d,株型松散,呈塔形,铃长卵圆形;抗枯萎病、耐黄萎病;抗棉铃虫、高抗红铃虫.2018―2019年四川省棉花品种区域试验中,该品种平均籽棉和皮棉产量分别为3797.88 kg·hm-2和1541.19 kg·hm-2.介绍了中棉所135的选育过程、特征特性、纤维品质及其栽培技术要点.
2021年我国肉羊生产继续向好.国家统计局数据显示,全年羊出栏33045万只,较2020年增长3.5％;羊肉产量514万吨,增长4.4％.受居民消费结构升级带动,全年羊肉价格和肉羊出栏价格继续处于高位,肉羊养殖保持较好收益.全年进口羊肉41.1万吨,同比增长12.5％.展望2022年,肉羊产业发展将继续保持良好势头,预计羊肉产量稳中有增,羊肉供需偏紧的状态会有所缓解,肉羊出栏价格和羊肉价格不会出现大幅度波动,肉羊养殖继续保持较好收益.
为掌握北京市猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)与国内外毒株基因型之间的差异性,无菌采集北京市宠物医院4例疑似患有猫传染性腹膜炎病例的腹水和组织等病料样本,将经RT-PCR诊断为猫冠状病毒(FCoV)阳性的病料样本接种于猫肾细胞(CRFK)进行连续传代培养,结果分离到1株毒株.对分离毒株进行形态学观察,RT-PCR检测,TCID50测定以及基因测序及遗传演化分析.结果显示:该毒株在CRFK上出现典型细胞病变效应(CPE),且经连续细胞接种,可以得到稳定增殖;RT-PCR扩增获得与预期目的基因片段大小一致的条带,
为解决鲁西南两熟制传统植棉机械化程度低、投入大、效益低等突出问题,创建了花椒间作蒜后直播短季棉“三元”轻简高效栽培新模式,成功示范并取得了显著的经济、社会和生态效益.本文从品种选择、种植模式、播前准备、机械精播、田间管理、病虫害防治、脱叶催熟收获等方面介绍了该模式的轻简高效栽培技术,为该技术的推广应用提供参考.
我国是世界棉花生产和消费大国.开放条件下,我国棉花的机械化生产水平不断提高,但国内棉花供应仍处于供不应求的状态,棉花贸易长期处于净进口局面.同时,棉花产业发展也深受贸易摩擦和某些国家政治打压的影响.基于我国棉花生产和贸易数据,运用进口市场集中度、进口依存度、出口依存度、自给率、国际竞争力等指标对我国棉花产业安全程度进行评估.分析得出:我国国内棉花的供求矛盾突出,棉花行业的安全性整体较差,尤其是近几年存在棉花进口依存度逐年升高、我国棉花进口市场来源相对比较集中等问题.为了保证棉花产业的健康发展,建议:采取措
为获得东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)的NCRBL-081基因序列,并对NCRBL-081编码蛋白进行预测和分析.本研究利用RT-PCR克隆NCRBL-081基因,利用相关生物信息学工具对NCRBL-081编码蛋白进行预测.结果表明:NCRBL-081共含有630个核苷酸,可编码含209个氨基酸的亲水性蛋白;NCRBL-081编码蛋白含有1个信号肽,6个明显的丝氨酸,5个酪氨酸磷酸化位点及1个跨膜结构域;该蛋白含有20.10％的α螺旋,8.61％的β折叠,25.84％的延伸链及45.45％
为探究调控绒山羊毛囊发生发育阶段关键circRNA及其功能,基于课题组前期得到的内蒙古绒山羊胎儿期(45、55、65和75 d)皮肤组织circRNA表达谱以及各比对组中差异表达circRNA的基础,根据不同时期毛囊形态发生发育情况筛选了毛囊发生发育相关的circRNA,利用生物信息学分析毛囊发生发育关键circRNA,并对其进行qRT-PCR试验;运用TargetScan和miRanda预测关键circRNA靶向的miRNA以及靶向miRNA的靶基因,分析了22个内含子circRNA宿主基因的富集情况,
随着市场经济的推进和畜牧业生产现代化进程的快速发展,数字畜牧业在乡村振兴和生产中的重要地位逐渐突显.由于原有的统计方法已经无法适应畜牧业转型升级的结构性调整需求,作为数字化进程的重要一环—监测预警体系建设迫在眉睫.自2006年起,辽宁省走在全国前列,开始研究并建设畜牧业生产监测预警体系.2008年,辽宁省结合农业农村部组织实施的“百场千村万户”监测计划,共同开展“省部共建”监测项目,至今已实施多年,取得了较为突出的成绩.
大数据主要是指利用现代化信息技术对实际生产生活以及管理服务过程中的各种信息进行采集、传输以及汇总,使其能够具备现代化的数据系统处理能力的数据.其主要特点为数据量巨大、类型比较多、速度非常快等.在大数据环境中,畜牧产业各个环节中的链条都有效地连接起来,对畜牧业信息化建设有着非常重大的意义,既有利于畜牧业信息化建设的转型与升级,又能为畜牧业生成经营管理中的决策提供正确的指导,进而促进我国畜牧业现代化建设的长远发展.