【摘 要】
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目的 研究青蒿素(ART)通过线粒体损伤途径诱导乳腺癌细胞凋亡的作用机制.方法 不同浓度的青蒿素(0,20,40,60μmol·L-1)处理乳腺癌MCF-7细胞,用噻唑蓝法检测细胞存活率;并将MCF-7细胞分为4组:Control组(不做处理)、ART组(60μmol·L-1青蒿素处理)、ART+anti-miR-NC(60μmol·L-1青蒿素处理+转染anti-miR-NC)、ART+anti-miR-483-5p(60μmol·L-1青蒿素处理+转染anti-miR-483-5 p).用流式细胞术检
【机 构】
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唐山市工人医院 肿瘤外科,河北 唐山063000
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目的 研究青蒿素(ART)通过线粒体损伤途径诱导乳腺癌细胞凋亡的作用机制.方法 不同浓度的青蒿素(0,20,40,60μmol·L-1)处理乳腺癌MCF-7细胞,用噻唑蓝法检测细胞存活率;并将MCF-7细胞分为4组:Control组(不做处理)、ART组(60μmol·L-1青蒿素处理)、ART+anti-miR-NC(60μmol·L-1青蒿素处理+转染anti-miR-NC)、ART+anti-miR-483-5p(60μmol·L-1青蒿素处理+转染anti-miR-483-5 p).用流式细胞术检测各组细胞凋亡率;用蛋白质印迹法检测各组细胞Cl-caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyto-C)和细胞凋亡诱导因子(AIF)蛋白表达情况;用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)发检测各组细胞miR-483-5 p表达情况.结果 Control组、ART组、ART+anti-miR-NC组和ART+anti-miR-483-5 p组的细胞凋亡率分别为(6.01±0.87)％,(19.06±1.67)％,(20.11±2.04)％,(10.37±1.07)％;线粒体Cyto-C蛋白表达量分别为0.91±0.09,0.39±0.05,0.42±0.06,0.85±0.07;线粒体AIF蛋白表达量分别为0.88±0.10,0.38±0.05,0.35±0.06,0.78±0.09;细胞质Cyto-C蛋白表达量分别为0.41±0.05,0.73±0.07,0.81±0.09,0.46±0.06;细胞质AIF蛋白表达量分别为0.31±0.03,0.90±0.09,0.86±0.10,0.42±0.06;各组miR-483-5p表达量分别为1.00±0.06,2.39±0.29,2.46±0.20,1.23±0.08.以上指标:Control组与ART组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),ART+anti-miR-NC组与ART+anti-miR-483-5p组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 青蒿素可通过miR-483-5p激活线粒体损伤进而诱导MCF-7细胞凋亡.
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