【摘 要】
：
目的:对1个ACTN1相关血小板减少症家系进行临床表型和基因型研究,并探讨其分子发病机制.方法:抽取全部家系成员外周血,检测血常规、血涂片、凝血功能、血小板聚集试验.流式细胞术检测血小板CD41和CD61的表达.先证者及其父亲行骨髓细胞形态学检测.全外显子测序技术扩增血小板型出血障碍相关基因所有外显子及其侧翼序列,PCR产物纯化后直接测序进行基因分析.采用生物信息学软件评估突变位点保守性、危害性;采用分子结构模拟图分析预测突变氨基酸对α-肌动蛋白-1结构和功能的影响.结果:先证者血小板数88 x 109/
【机 构】
：
北京大学国际医院血液科,北京102206;北京大学国际医院检验科,北京102206;北京大学人民医院血液科、北京大学血液病研究所,北京100044
论文部分内容阅读
目的:对1个ACTN1相关血小板减少症家系进行临床表型和基因型研究,并探讨其分子发病机制.方法:抽取全部家系成员外周血,检测血常规、血涂片、凝血功能、血小板聚集试验.流式细胞术检测血小板CD41和CD61的表达.先证者及其父亲行骨髓细胞形态学检测.全外显子测序技术扩增血小板型出血障碍相关基因所有外显子及其侧翼序列,PCR产物纯化后直接测序进行基因分析.采用生物信息学软件评估突变位点保守性、危害性;采用分子结构模拟图分析预测突变氨基酸对α-肌动蛋白-1结构和功能的影响.结果:先证者血小板数88 x 109/L,血涂片可见哑铃状血小板、蛇形血小板及血小板大小不等;骨髓细胞形态学:巨核细胞形态正常,计数270个.先证者的父亲血小板数74×109/L,血涂片可见大血小板,血小板大小不等;骨髓细胞形态学:巨核细胞计数239个.先证者的祖父血小板数83×109/L,血涂片可见蛇形血小板、血小板大小不等.其余家系成员各项检测指标均正常.先证者ACTN1基因第20外显子c.2396G＞A错义突变导致所编码蛋白质799位氨基酸Arg突变为His.先证者的父亲、祖父在该位点的测序结果均与先证者相同.生物信息学分析显示该位点在不同物种之间高度保守,该位点的变异可能导致蛋白功能损害;通过蛋白模型分析显示α-肌动蛋白-1 799位Arg与811位Glu形成临界盐桥,稳定钙调蛋白样基序内Ca2+结合环的构象.R799H突变失去了这个关键的盐桥,使该结构域失稳态.结论:新发现的ACTN1基因第20外显子c.2396G＞A错义突变是导致本研究家系血小板减少症发生的分子机制.
其他文献
目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)病程中患者血清补体C1q的变化,及其与临床特征间的关系.方法:选取2016年6月至2019年12月武汉大学中南医院收治的138例初诊MM住院患者为研究对象,另根据年龄匹配同期入院的贫血患者及非MM血液肿瘤患者,包括淋巴瘤、白血病及骨髓增生异常综合征各50例为对照(所有患者均符合WHO疾病分类标准,病理或骨髓涂片/活检明确诊断),比较MM患者与对照组间及MM患者治疗前后不同疗效组C1q水平的变化,比较不同C1q水平时MM患者临床特征间的差异,进而分析导致C1q下降的风险因素.结
目的:研究多发性骨髓瘤(MM)患者基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及临床意义,并进一步研究多西环素(DOX)对MM细胞MMP-2、MMP-9表达的影响.方法:收集MM患者外周血浆及骨髓标本,将患者分为新诊断组、缓解组和难治复发组,另选取34例我院健康体检者的外周血浆为正常对照组,17例我院血液科就诊的缺铁性贫血患者的骨髓为对照组,ELISA法检测MMP-2、MMP-9的表达;不同浓度DOX处理骨髓瘤细胞株H929 一定时间后,Western blot法检测MMP-2
目的 探讨在常规西药治疗基础上,采用固肠止泻丸辅助治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的临床效果.方法 收集盘锦市中医医院2020年1—12月收治的U C患者100例,随机分为对照组和观察组各50例.对照组采用常规西药治疗,观察组在此基础上加用固肠止泻丸.比较两组治疗4个疗程后的中医证候评分、炎症因子及肠道菌群改善情况.结果 治疗4个疗程后,观察组呕吐、腹痛、腹泻、里急后重、脓血便作证候评分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组TNF-α、IL-1、IL-6、IL
目的 应用超声能量的功效学等评价指标,与常规超声乳化劈核技术进行比较,观察超声乳化斜面向下劈核技术(drill)治疗硬核白内障的临床疗效.方法 选择2018年7月—2020年6月在昆仑朝聚眼科医院住院的单眼硬核白内障患者60例(60只眼),晶状体核Ⅳ级以上(Emery分级法).其中将接受drill劈核技术的30例(30只眼)患者设为研究组,选择同时期接受常规超声乳化劈核技术的30例(30只眼)患者作为常规组.记录并观察两组的术中超声能量和时间,计算术中超声乳化能量合成值,观察术后6个月眼压、最佳矫正视力、
目的:分析成都市新都区孕妇α、β地中海贫血的基因型特点及各血液学指标的诊断价值.方法:采用血常规参数(MCV)＜80 fl和(或)(MCH)＜27 pg及血红蛋白电泳对孕妇进行初筛,初筛阳性者采用PCR-反向斑点杂交检测技术进行常见α、β地中海贫血基因检测,对于确诊为地贫孕妇,召回其丈夫直接进行地贫基因检测,对高度疑似患者进行基因测序复核结果.结果:7 049例孕妇中,初筛阳性1 740例(24.68％).地贫基因确诊阳性180例,其中α地中海贫血94例(52.22％),共检出6种基因型,基因型--SEA
目的:对1个遗传性凝血因子Ⅻ(FⅫ)缺陷症家系进行临床表型及基因突变分析,探讨其分子致病机制.方法:检测先证者及其家系成员(共3代5人)血浆凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原含量(FIB)、D-D二聚体(D-D)、凝血因子Ⅻ促凝活性(FⅫ:C)和凝血因子Ⅻ抗原(FⅫ∶Ag)等凝血指标.采用高通量测序方法分析先证者F12基因所有的外显子编码区及外显子-内含子交界处的基因突变情况,对检出的可疑致病突变进行Sanger测序验证,并对家系成员的相应突变位点进行检测.采用AutoPV
目的 观察催乳汤联合穴位按摩对产后乳汁不足的治疗效果.方法 选取沈阳市妇婴医院2019年8月—2020年8月60例产后乳汁不足患者为研究对象,采取随机数字表法分为观察组和对照组各30例.对照组予以均衡营养干预及穴位按摩进行治疗,观察组在此基础上给予联合催乳汤进行治疗.观察比较两组治疗前后泌乳素(PRL)水平、泌乳量、补授乳量及乳房充盈程度,对两组临床疗效进行评估和对比分析.结果 治疗前,两组PRL水平、泌乳量、补授乳量差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组PRL水平增高,且增高幅度大于对照组,
目的:用CRISPR/Cas9技术构建稳定表达的ITGA2B c.2659C＞T(p.Q887X)无义突变的血小板无力症小鼠模型,并对其血小板膜表面糖蛋白αⅡbβ3的功能做进一步研究.方法:根据ITGA2B基因信息设计并合成针对c.2659C位置的供体寡核苷酸和gRNA载体并进行体外转录.将gRNA和Cas9 mRNA与供体寡核苷酸共注射到受精卵,并送回到代孕鼠输卵管中.鼠出生后进行PCR基因分型和序列分析,获得阳性F0鼠.阳性F0鼠分别与野生型鼠配繁一代,获得经PCR和测序验证的F1代杂合型点突变GT小
目的:探讨CXCR4对卡菲佐米(CFZ)治疗多发性骨髓瘤(MM)患者的效果及预后的影响.方法:下载在线数据库Gene Expression Omnibus(GEO)中含两种耐CFZ的MM细胞株(KMS11/CFZ及KMS34/CFZ)以及相对应的亲本株KMS11和KMS34基因表达谱数据的数据集GSE69078.分析差异表达基因(DEGs)并构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络,获得CFZ耐药关键基因.最终,以MMRF-CoMMpass研究数据作为验证数据集探讨CFZ耐药关键基因的临床意义.结果:共鉴定出44
目的:探讨不同年龄段地中海贫血患儿接受造血干细胞移植后疗效的差异.方法:回顾性分析我科收治的地中海贫血患儿临床资料,以5岁为界,分为2-5岁组和6-12岁组,比较两组患儿植入成功率、移植相关死亡率、GVHD发生率和其他移植相关并发症差异,以及无地中海贫血生存率差异.结果:2-5岁组移植后GVHD发生率、出血性膀胱炎和重度口腔黏膜炎发生率均显著低于6-12岁组,两组无地中海贫血生存率比较差异无统计学意义.结论:低年龄组(2-5岁)患儿移植后并发症少,生存质量高,选择2-5岁之间进行干细胞移植更利于患儿的康复