荞麦籽粒中抗真菌蛋白的分离纯化及抗真菌活性研究

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为了深入研究荞麦中抗真菌类蛋白质,选择荞麦品种‘晋荞2号’籽粒为试验材料,先经过筛、脱脂,然后利用缓冲液浸提、硫酸铵盐析提取籽粒中总蛋白,水浴锅中80℃下热处理去除杂蛋白,经过Resourse S阳离子交换层析和Superdex Peptide HR10/300分子筛层析两步分离纯化,建立了一套荞麦抗真菌蛋白分离纯化的工艺。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定该抗真菌蛋白的相对分子质量,牛津杯法测定抑菌活性,倒置显微镜观察真菌形态变化。结果表明:试验获得的荞麦籽粒抗真菌蛋白在蛋白胶图上表现出单一条带,纯度较高,相对分子质量为8.2 kDa。该抗真菌蛋白对绿色木霉的生长有明显的抑制作用,并且呈现一定的剂量依赖性。形态学观察发现,菌丝生长受到抑制,表现出顶端部膨大、泡状物出现、原生质凝缩及片段化等特征。
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