维生素C前体物质2-酮基-L-古龙酸的鉴定

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目的建立鉴定发酵液中2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)的方法,以将其与副产物2-酮基-D-葡萄糖酸(2-DKG)、5-酮基-D-葡萄糖酸(5-DKG)区别开来。方法通过薄层层析法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)、熔点测定等方法对标准品和发酵产物进行对比分析,确定发酵产物中2-KLG和标准品在这些方法中鉴定结果的一致性。结果薄层层析(TLC)结果显示发酵产物和2-KLG标准品层析图谱在Rf值、大小和颜色上基本一致;高效液相色谱法(HPLC)在保留时间8 min左右产物和标准品明显存在一个峰、熔点均在170℃左右,产物的pH与2-KLG标准品的pH最接近,而与2-DKG和5-DKG明显存在差异。结论该方法体系可鉴定未知发酵产物中是否含有2-酮基-L-古龙酸(2-KLG),对选育从D-葡萄糖一步发酵生产2-KLG的新型菌株具有重要意义。
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