【摘 要】
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目的 扩增嗜肺军团菌基因pip,构建重组质粒pET-pip并在原核系统中表达.方法 采用PCR,从嗜肺军团菌基因组DNA中扩增出pip基因,将其定向克隆至原核表达载体pET-32a（＋）,构建重组质
【机 构】
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宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系,生育力保持省部共建教育部重点实验室
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目的 扩增嗜肺军团菌基因pip,构建重组质粒pET-pip并在原核系统中表达.方法 采用PCR,从嗜肺军团菌基因组DNA中扩增出pip基因,将其定向克隆至原核表达载体pET-32a（＋）,构建重组质粒pET-pip,经限制性内切酶、PCR鉴定及测序分析后,转化BL21,IPTG诱导表达,并用SDS-PAGE进行鉴定.使用His-tag纯化重组蛋白PIP.结果 扩增出了嗜肺军团菌726bp的pip基因,构建的原核表达重组质粒pET-pip表达并纯化出了约46kD Trx-PIP的融合蛋白.结论 成功构建了嗜
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