【摘 要】
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目的 探讨雷公藤内酯醇诱导体外培养皮肤鳞状细胞癌细胞系A431凋亡的作用机制.方法 将雷公藤内酯醇按不同浓度、不同作用时间分别培养A431,Annexin V-FITC/PI染色经流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光显微镜下观察FITC标记的早期凋亡细胞及PI阳性的中晚期凋亡细胞.通过分光光度计检测凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性.结果 A431细胞经1、10、
【机 构】
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226001,江苏,南通大学附属医院皮肤科,南通大学医学院病理学教研室,226001,江苏,南通大学附属医院皮肤科
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目的 探讨雷公藤内酯醇诱导体外培养皮肤鳞状细胞癌细胞系A431凋亡的作用机制.方法 将雷公藤内酯醇按不同浓度、不同作用时间分别培养A431,Annexin V-FITC/PI染色经流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光显微镜下观察FITC标记的早期凋亡细胞及PI阳性的中晚期凋亡细胞.通过分光光度计检测凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性.结果 A431细胞经1、10、100 mg/L雷公藤内酯醇作用后.在12 h 出现早期凋亡,其凋亡率与雷公藤内酯醇的浓度及作用时间有依赖关系;荧光显微镜下12 h出现早期凋亡细胞,24 h出现典型的凋亡细胞.雷公藤内酯醇作用A431细胞后,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9活性在12 h开始增高,Caspase-3、Caspase-9的活性在24 h达到最高,Caspase-3活性三个浓度组的A值分别是0.723,0.850,1.127,Caspase-9活性则为1.072,1.091,1.191,Caspase-8在18 h达到高峰,其A值分别是0.641,0.780,0.910,三项指标的活性均明显高于对照组(P<0.05).结论 雷公藤内酯醇能诱导A431细胞凋亡,其作用存在浓度及时间依赖关系。
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