雷公藤内酯醇诱导PC3细胞凋亡的机制研究

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目的 观察雷公藤内酯醇( triptolide,TPL)对去势后抵抗性前列腺癌(Castration-Resistant Prostate Cancer,CRPC) PC3细胞的生长增殖抑制作用,对其诱导凋亡相关基因进行分析.方法 MTT比色法观察TPL对PC3细胞的生长增殖抑制作用;Annexin-V/PI标记分析细胞凋亡;RT-PCR方法检测0、6、12、24 h BCL-2、BAX、PIG3、P21、FAS、CASPASE3等与凋亡相关基因表达变化.结果 TPL抑制PC3细胞生长呈时间和剂量依赖性,24h和48 h半数抑制浓度分别为18.3 ng/ml和13.5ng/ml,与24h组相比,48 h组低浓度(5 ng/ml,t=1.47,P>0.05)和高浓度(160 ng/ml,t =0.91,P>0.05)差异无统计学意义.而10 ng/ml(t=3.26,P<0.05)、20 ng/ml(t=4.21,P<0.05)、40ng/ml(t=4.09,P<0.05)、80ng/ml(t=2.91,P<0.05)差异有统计学意义.Annexin-V/PI检测经18.3 ng/ml TPL处理后的PC3细胞凋亡随着作用时间的延长而增多,相对于对照组,6、12、24 h组Anexin-V阳性/PI阴性表达率分别为(5.42±2.21)%(t=3.52,P<0.05)、(13.51±3.37)%(t=6.53,P<0.01)、(29.3±4.53)%(t=8.74,P<0.01)差异有统计学意义,并且各组间差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR显示经18.3 ng/ml TPL处理后,BAX、PIG3表达递增,P21、BCL-2表达递降,FAS、CASPASE3表达无明显改变.结论 TPL可以抑制PC3生长增殖并诱导细胞凋亡,而在凋亡的过程中,BAX、BCL-2、PIG3、P21等基因的改变可能扮演着重要的角色.
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