【摘 要】
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目的 观察解毒通络生津方对干燥综合征（SS）模型NOD小鼠PD-1/PD-L1通路的影响，探讨其作用机制。方法 将24只8周龄雌性NOD小鼠随机分为3组，即模型组（Model）、解毒通络生津方组（TCM）、解毒通络生津方加抗PD-L1单抗阻断组（TCM+α-PD-L1），每组8只。另选8只8周龄雌性ICR小鼠作为正常对照组（Ctrl）。12周龄时开始中药干预，TCM组按照每天24.4 g·kg-1
【机 构】
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上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院
【基金项目】
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国家自然科学基金委员会面上项目（81573925）：基于PD-1/PD-L1通路对Treg细胞的调控探讨解毒通络生津方治疗干燥综合征的作用机制,负责人：薛鸾；
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目的 观察解毒通络生津方对干燥综合征（SS）模型NOD小鼠PD-1/PD-L1通路的影响，探讨其作用机制。方法 将24只8周龄雌性NOD小鼠随机分为3组，即模型组（Model）、解毒通络生津方组（TCM）、解毒通络生津方加抗PD-L1单抗阻断组（TCM+α-PD-L1），每组8只。另选8只8周龄雌性ICR小鼠作为正常对照组（Ctrl）。12周龄时开始中药干预，TCM组按照每天24.4 g·kg-1解毒通络生津方灌胃，TCM+α-PD-L1组在每天给予24.4 g·kg-1解毒通络生津方灌胃的基础上，腹腔注射抗PD-L1抗体，1周2次，每次100μg,Ctrl组和Model组给予同等剂量的生理盐水灌胃，实验期间记录各组小鼠第9、12、16、20周龄时的日均饮水量，干预8周后，小鼠统一麻醉下摘取颌下腺。HE染色观察各组小鼠颌下腺中炎症细胞浸润情况；流式细胞仪检测小鼠颌下腺CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg细胞的表达；Western Blot检测小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达。结果 随着小鼠周龄的增长，Ctrl组小鼠日均饮水量基本不变，Model组小鼠的日均饮水量有明显上升趋势，TCM组小鼠日均饮水量下降，TCM+α-PD-L1组小鼠日均饮水量上升；与Model组比较，TCM组炎症细胞浸润灶明显减少（P＜0.001）；与TCM组比较，TCM+α-PD-L1组炎症细胞浸润增多（P＜0.001）；与Ctrl组比较，Model组CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg的表达降低（P＜0.001），与Model组比较，TCM组CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg表达升高（P＜0.01）；与TCM组比较，TCM+α-PD-L1组CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg的表达降低（P＜0.01）；与Ctrl组比较，Model组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达降低（P＜0.01）；与Model组比较，TCM组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达升高（P＜0.01）；与TCM组比较，TCM+α-PD-L1组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达降低（P＜0.001）。结论 解毒通络生津方可能通过PD-1/PD-L1信号通路促进SS模型小鼠Treg细胞活化，上调Foxp3的表达，增强Treg细胞抑制免疫炎症的作用，PD-1/PD-L1可能是解毒通络生津方治疗SS的一个作用靶点。
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