miR-515-5p促进喉癌细胞增殖、迁移和顺铂耐药

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目的:探讨miR-515-5p对喉癌细胞增殖、迁移和顺铂耐药的影响并预测其潜在的靶基因。方法:在喉癌细胞FD-LSC-1和AMC-HN-8中:采用逆转录定量PCR(quantitative revserse transcription PCR,RT-qPCR)法检测miR-515-5p的表达量,敲低和过表达miR-515-5p后,采用细胞计数试剂盒(cell counting kit 8,CCK8)和克隆形成实验检测细胞增殖情况,Transwell实验检测细胞迁移情况,并通过CCK8法检测细胞对顺铂的敏感性。构建裸鼠移植瘤模型,通过小动物活体成像、称量瘤重和免疫组化实验检测敲低miR-515-5p对裸鼠移植瘤生长的影响。采用4个miRNA靶基因数据库、喉鳞状细胞癌芯片数据集和RT-qPCR实验预测miR-515-5p潜在的靶基因。结果:在FD-LSC-1和AMC-HN-8细胞中,miR-515-5p的表达水平显著升高(P <0.001)。敲低miR-515-5p后,FD-LSC-1和AMC-HN-8细胞的增殖能力、克隆形成数目、细胞迁移数目以及顺铂处理后的细胞活力均显著下降(P <0.05);裸鼠移植瘤的光子强度和肿瘤重量也明显降低(P <0.05),增殖标记物Ki-67的表达减少。而过表达miR-515-5p可明显促进喉癌细胞的增殖、迁移和顺铂耐药(P均<0.05)。miR-515-5p与聚(A)结合蛋白相互作用蛋白2B[poly(A)binding protein interacting protein 2B,PAIP2B]具有负调控关系(P <0.05)。结论:miR-515-5p可能通过调控靶基因PAIP2B的表达来促进喉癌细胞增殖、迁移和顺铂耐药,在喉癌靶向治疗联合顺铂化疗中发挥重要的作用。
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