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研究非受体酪氨酸激酶蛋白c-Abl在高糖诱导足细胞损伤中的作用及可能的信号转导通路。
方法体外培养条件永生性小鼠足细胞，并用不同浓度葡萄糖不同时间刺激已分化足细胞，免疫荧光染色和Western印迹检测足细胞中c-Abl蛋白的表达和分布改变。采用c-Abl siRNA转染沉默足细胞表达c-Abl，细胞分成正常对照组(5 mmol/L葡萄糖)、高渗对照(25 mmol/L甘露醇)组、高糖组、高糖+c - Abl siRNA组。应用流式细胞术及Hoechst33258染色评价足细胞凋亡水平，Western印迹法检测c-Abl及p53蛋白的表达水平，免疫荧光染色观察足细胞内c-Abl分布的改变，免疫共沉淀法检测c-Abl与p53蛋白的结合水平。
结果与对照组比较，高糖刺激导致足细胞凋亡率增加(P<0.05)；c-Abl表达水平增加(P<0.05)，并以时间和浓度依赖方式增加且存在核转移现象；同时p53蛋白表达水平上调，c-Abl与p53的结合水平增加(均P<0.05)。与高糖组比较，c-Abl siRNA转染后c-Abl蛋白表达水平降低(P<0.05)且核转移减弱，高糖诱导足细胞凋亡率下降(P<0.05)，且c-Abl与p53结合水平降低(P<0.05)。上述各项高渗组与对照组差异均无统计学意义(均P>0.05)。
结论c-Abl蛋白是高糖诱导足细胞损伤的促凋亡因子，其作用机制与p53信号通路有关。