【摘 要】
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目的研究不同管径钛纳米管表面结构对体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞(rat mesenchymal stem cells,rMSCs)粘附、增殖及成骨向分化的影响。方法分离并扩增rMSCs,成骨向诱导分
【机 构】
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重庆医科大学口腔医学院,口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室,
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目的研究不同管径钛纳米管表面结构对体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞(rat mesenchymal stem cells,rMSCs)粘附、增殖及成骨向分化的影响。方法分离并扩增rMSCs,成骨向诱导分化及流式细胞鉴定;阳极氧化法分别制备管径30、70、100 nm的TiO2纳米管,扫描电镜观察表面形貌、接触角测试材料表面亲疏水性;MTT法检测细胞在材料表面粘附及增殖情况,激光共聚焦显微镜观察细胞在材料表面形貌。评价细胞在纯钛,管径30、70、100 nm的TiO2纳米管表面成骨向分化过程中碱性磷酸酶活性变化特征及矿化情况。Real-time PCR检测诱导14 d后Runx2及OSX基因表达情况。结果分离获得的rMSCs具有成骨向分化的能力,CD29阳性细胞为99.65%;扫描电镜观察各组材料表面管径均达到设计要求;管径为70 nm的TiO2纳米管材料表面亲水性较好(P<0.05);MTT结果显示70 nm组rMSCs的粘附、增殖均较其他组明显增高(P<0.05);30 nm组在成骨诱导7 d后,碱性磷酸酶活性均高于其他组(P<0.05)。30 nm组在成骨诱导21 d后表面矿化高于其他组(P<0.05)。30 nm组在成骨诱导14 d后Runx2及OSX基因表达高于其余组(P<0.05)。结论与光滑面纯钛相比,不同管径的TiO2纳米管对rMSCs的作用各不相同,rMSCs在70nm表面增殖能力和粘附性较好,但在30 nm表面的成骨向分化能力较强。
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