基于金纳米颗粒的裂分型适配体传感器检测三磷酸腺苷

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构建了一种基于金纳米颗粒(Gold nanoparticles,AuNPs)的裂分型适配体荧光传感器,用于检测三磷酸腺苷(ATP).将ATP核酸适配体序列分裂为P1和P2两个片段,在P1的5′端修饰荧光基团羧基荧光素(FAM),3′端巯基化修饰的P2通过Au—S键以自组装的方式修饰在AuNPs表面.未加入ATP时,P1与P2不结合,此时P1远离AuNPs,荧光信号较强;加入ATP后,可形成P1-ATP-P2的三明治结构,P15′端的FAM荧光基团靠近AuNPs,发生荧光共振能量转移,导致荧光信号减弱.对AuNPs与P2的结合、浓度比例以及加入P1和ATP后的稳定时间等实验条件进行了优化.在最优的条件下,传感器的荧光强度与ATP浓度在0.03~3.33 nmol/L和3.33~15 nmol/L浓度范围内呈两段的线性关系,检出限为0.03 nmol/L.该传感器对ATP表现出良好的特异性.
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