【摘 要】
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目的探讨中草药提取物白花丹醌对人白血病细胞系HL-60甲基化的影响机制。方法MTS法确定不影响细胞生长的白花丹醌研究浓度;白花丹醌研究浓度作用于HL-60细胞不同时间,ELISA法测定其甲基化水平和DNA甲基转移酶（DNMT）活性;实时荧光定量PCR评估DNMT酶类基因mRNA表达水平。结果选定白花丹醌0.8μmol/L作为研究浓度,作用18h,HL-60细胞甲基化水平显著下降[（1.63±0.2
【基金项目】
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浙江省宁波市自然科学基金项目（No.2017A610210）；
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目的探讨中草药提取物白花丹醌对人白血病细胞系HL-60甲基化的影响机制。方法MTS法确定不影响细胞生长的白花丹醌研究浓度;白花丹醌研究浓度作用于HL-60细胞不同时间,ELISA法测定其甲基化水平和DNA甲基转移酶（DNMT）活性;实时荧光定量PCR评估DNMT酶类基因mRNA表达水平。结果选定白花丹醌0.8μmol/L作为研究浓度,作用18h,HL-60细胞甲基化水平显著下降[（1.63±0.27）ng比（2.42±0.41）ng,P<0.05],这种去甲基化作用能被活性氧（ROS）阻滞剂所逆转,使得预处理组与对照组甲基化水平无显著差异[（2.11±0.16）ng比（2.27±0.21）ng,P>0.05];白花丹醌作用12h后,与对照组比较出现DNMT总体活性的下降[（0.91±0.09）OD·h-1·μg-1比（1.24±0.19）OD·h-1·μg-1,P<0.05],作用24h后活性下降更明显[（0.69±0.08）OD·h-1·μg-1比（1.24±0.19）OD·h-1·μg-1,P<0.01];白花丹醌对DNMT1、DNMT3b基因的表达具有明显抑制作用（P<0.05）,对DNMT3a基因的表达作用不明显。结论低浓度白花丹醌以ROS为重要介质,能够诱导白血病细胞去甲基化,这种作用与抑制DNMT活性,抑制DNMT1和DNMT3b基因的表达有关。
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