【摘 要】
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目的 观察延龄草皂苷（TSTT）对脑缺血大鼠梗死灶周围皮层少突胶质细胞GSK-3/β-catenin/CRMP2信号表达的影响，探讨其改善脑缺血的作用机制。方法 采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型，将大鼠随机分为假手术组、模型组、TSTT 65 mg/kg组、TSTT 33 mg/kg组和金纳多组，连续灌胃给药15 d。HE染色观察大鼠脑组织病理变化，LFB染色观察脑组织神经纤维损伤，免疫荧光染色
【机 构】
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首都医科大学中医药学院中医络病研究北京市重点实验室
【基金项目】
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北京市教育委员会科技发展计划面上项目（KM201510025011）；
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目的 观察延龄草皂苷（TSTT）对脑缺血大鼠梗死灶周围皮层少突胶质细胞GSK-3/β-catenin/CRMP2信号表达的影响，探讨其改善脑缺血的作用机制。方法 采用线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型，将大鼠随机分为假手术组、模型组、TSTT 65 mg/kg组、TSTT 33 mg/kg组和金纳多组，连续灌胃给药15 d。HE染色观察大鼠脑组织病理变化，LFB染色观察脑组织神经纤维损伤，免疫荧光染色检测梗死灶周围皮层2′,3′-环核苷酸-3′-磷酸二酯酶（CNPase）、蛋白聚糖（NG2）、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）、β-连环蛋白（β-catenin）表达，实时荧光定量PCR检测梗死灶周围皮层GSK-3、β-catenin、脑衰蛋白反应调节蛋白-2（CRMP2）基因表达。结果 与假手术组比较，模型组大鼠患侧脑组织明显坏死，神经细胞大量死亡，胞体皱缩，单位面积神经细胞数量显著减少（P＜0.01），神经纤维丢失、排列混乱，髓鞘中有大量空泡，神经纤维相对积分光密度显著减少（P＜0.01）；与模型组比较，TSTT 65、33 mg/kg组大鼠神经细胞形态有所改善，单位面积神经细胞数量显著增加（P＜0.05,P＜0.01），神经纤维排列较有序，髓鞘中空泡较少，神经纤维相对积分光密度显著增加（P＜0.01）。免疫荧光染色结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠梗死灶周围皮层CNPase阳性表达显著降低，NG2阳性表达显著升高（P＜0.01）,NG2/GSK-3β、NG2/β-catenin、CNPase/GSK-3β、CNPase/β-catenin阳性细胞显著增加（P＜0.01）；与模型组比较，TSTT65、33 mg/kg组大鼠梗死灶周围皮层CNPase、NG2表达显著升高，CNPase/GSK-3β、NG2/GSK-3β阳性细胞显著减少，CNPase/β-catenin、NG2/β-catenin阳性细胞显著增加（P＜0.05,P＜0.01）。实时荧光定量PCR结果显示，与假手术组比较，模型组大鼠梗死灶周围皮层GSK-3αmRNA表达显著升高（P＜0.05），β-catenin、CRMP2 mRNA表达显著降低（P＜0.05,P＜0.01）；与模型组比较，TSTT 65 mg/kg组大鼠梗死灶周围皮层GSK-3α、GSK-3βmRNA表达显著降低，β-catenin和CRMP2mRNA表达显著升高（P＜0.05）。结论 TSTT可减轻脑缺血大鼠脑组织损伤，保护少突胶质细胞，促进少突胶质前体细胞存活，其机制可能与下调GSK-3表达，上调β-catenin、CRMP2表达有关。
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