【摘 要】
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为筛选出特异的肝片吸虫诊断候选抗原,拓展诊断靶标,利用肝片吸虫阳性血清筛选肝片吸虫cDNA表达文库,获得肝片吸虫特异性抗原基因,采用RT-PCR技术扩增目的 基因,连接表达载体pET-32a(+),构建重组质粒,转化入感受态细胞BL21 (DE3)中,利用IPTG对重组蛋白进行诱导表达,通过SDS-PAGE及Western blot技术对蛋白表达情况进行鉴定.结果 显示:经筛选获得了17个肝片吸虫免疫显性抗原基因,其中假定蛋白Fh010935为肝片吸虫特异性抗原基因;扩增得到的Fh010935核苷酸序列大
【机 构】
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吉林大学动物医学学院,吉林长春130000
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为筛选出特异的肝片吸虫诊断候选抗原,拓展诊断靶标,利用肝片吸虫阳性血清筛选肝片吸虫cDNA表达文库,获得肝片吸虫特异性抗原基因,采用RT-PCR技术扩增目的 基因,连接表达载体pET-32a(+),构建重组质粒,转化入感受态细胞BL21 (DE3)中,利用IPTG对重组蛋白进行诱导表达,通过SDS-PAGE及Western blot技术对蛋白表达情况进行鉴定.结果 显示:经筛选获得了17个肝片吸虫免疫显性抗原基因,其中假定蛋白Fh010935为肝片吸虫特异性抗原基因;扩增得到的Fh010935核苷酸序列大小为144 bp,编码48个氨基酸,A+T含量为55.56％;Fh010935蛋白由1个α-螺旋,2个β-折叠和3个β-转角构成,具有3个抗原表位,推测该蛋白可能具有较好的抗原性;重组蛋白主要以包涵体形式表达,分子量大小约24 ku,可以被肝片吸虫感染阳性血清特异性识别,具有较好的反应原性.提示:假定蛋白Fh010935可作为肝片吸虫病诊断候选抗原,为疾病诊断制剂的开发提供前期基础.
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鼠传疾病在我国比较多见,是一类鼠传播或者以鼠为中间媒介传播的,危害人群健康的疾病.受全球气候因素和人文因素的影响,鼠传疾病的流行区域不断扩大.除鼠疫外,钩端螺旋体病、肾综合征出血热等鼠传疾病传播范围广,传染性强,对社会损害程度较高.近年来,人们对鼠传疾病有了一定的认识,但对其真正的了解还很少.本文介绍我国常见鼠传疾病钩端螺旋体病、肾综合征出血热以及斑疹伤寒等疾病的流行病学特征及防治现状,以期为今后开展鼠传疾病的防控策略提供科学根据.
在细菌分离鉴定的研究过程中,发现了 1株具有抑菌活性的芽胞杆菌,命名为B901.经16SrRNA测序以及同源性比较,鉴定其为高山芽胞杆菌(Bacillus altitudinis).对该菌进行生物学特性分析、抑菌试验和安全性试验.结果表明:B901菌株对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有抑菌活性,B901抑菌产物产生较快,培养菌液pH值维持在5.6左右时抑菌活性维持在较高水平;提取的胞外多糖粗产物对6种指示菌均有较为明显的抑菌作用;B901对所选择的7种常用的代表性药物均在敏感水平以上,表明高山芽胞杆菌B901
为了解宠物猫源大肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药性及其耐药基因携带情况,在乌鲁木齐市多家宠物医院采集宠物猫肛拭子样品59份进行大肠杆菌的分离鉴定,通过琼脂稀释法测定10种抗菌药物的最小抑菌浓度,利用PCR方法检测13种耐药基因.结果:分离鉴定出大肠杆菌47株,分离率79.7％(47/59).分离菌对四环素(TET)(83.0％)、阿莫西林-克拉维酸(A/C)(66.0％)和磺胺异噁唑(FIS)(66.0％)耐药情况严重;对头孢他啶(TAZ)、头孢曲松(CRO)、恩诺沙星(EN)、庆大霉素(GEN)耐药率在3
穿支皮瓣是在传统轴型皮瓣基础上发展而来,以穿支血管供血,仅包括皮肤与浅筋膜组织的一种新型皮瓣,由于改变了深筋膜血管网是皮瓣赖以生存的传统观点,使皮瓣设计和形成更具灵活性和多样性[1-3].2012年唐举玉[4]在国际上首次提出的特殊形式穿支皮瓣是应用传统穿支皮瓣的“微创与美学”理念、根据受区修复要求对皮瓣供区的一级源血管及其分支和相应供养的组织(皮肤、筋膜、肌肉、骨组织)进行优化设计、无创解剖、分割和重组,根据受区创面重建需要切取不同组织块(嵌合)或相同组织块(分叶),然后再削薄、组装、拼接成与受区创面内
为进一步探索波形蛋白(vimentin)调控绒山羊绒毛生长的作用机制,以内蒙古遗传种子资源阿尔巴斯白绒山羊皮肤中的毛囊组织为材料,利用PCR技术和酵母双杂交技术对根据GenBank中山羊的vimentin蛋白序列,运用蛋白质互作在线软件预测和液相色谱质谱联用采集免疫共沉淀数据筛选出肌动蛋白(ACTB)和vimentin进行基因引物设计、克隆、酵母表达载体构建和蛋白互作鉴定.结果 显示:成功克隆出绒山羊vimentin基因CDS区序列的长度为1401 bp,ACTB基因CDS区序列的长度为1128 bp;构
2015年山东省烟台市某免疫伪狂犬病疫苗Bartha-K61猪场暴发疑似伪狂犬病疫情,临床表现为妊娠母猪繁殖障碍,仔猪神经症状.脑组织病料样品接种BHK21细胞,分离获得1株伪狂犬病病毒(PRV),命名为PRV-YT株.该病毒株gE基因与JS-2012、HN1201和ZJ01株序列同源性为99.4％～99.8％,且位于同一遗传进化分支.选择70日龄PRV阴性健康猪接种PRV-YT株,发病率和死亡率均达100％(5/5),均表现严重脑组织、肝脏与肺脏损伤,表明PRV-YT株为猪伪狂犬病病毒变异强毒株.本研究
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