【摘 要】
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目的筛选日本血吸虫(Schistosoma japonicum, Sj)新的疫苗候选基因或雌虫性别特异性基因. 方法用Sj雌虫抗原免疫家兔制备血清,对Sj成虫cDNA文库进行免疫筛选,将阳性克隆的插
【机 构】
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中南大学湘雅医学院病原生物学系,湖南长沙,410078;美国新英格兰生物研究所,MA,01915,USA
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目的筛选日本血吸虫(Schistosoma japonicum, Sj)新的疫苗候选基因或雌虫性别特异性基因. 方法用Sj雌虫抗原免疫家兔制备血清,对Sj成虫cDNA文库进行免疫筛选,将阳性克隆的插入片段进行PCR扩增,采用Sanger双脱氧核苷酸末端终止法对阳性克隆插入子进行测序,与GeneBank中的已知序列进行比对分析. 结果共获得26个阳性克隆,其PCR产物大小约0.5～3 kb.在进行测序的8个阳性克隆中发现了GeneBank未报道的Sj肌球蛋白的部分基因序列(GeneBank登录号为AY322148)和1个新基因(命名为Sj-F1,GeneBank登录号为AY261995).Sj-F1编码的蛋白理论分子质量为13.45 ku,等电点为6.29,富含α螺旋和随机卷曲,含多个蛋白激酶磷酸化位点,1个酪氨酸激酶Ⅱ磷酸化位点和1个豆蔻酸位点. 结论 Sj雌虫免疫血清可识别Sj特异性抗原分子,该抗原基因是否为雌虫性别特异性基因及其作为日本血吸虫病疫苗候选基因的价值,有待进一步研究.
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