“风寒湿致痹”理论指导下体内外骨关节炎模型建立与评价研究

来源 :中国中医基础医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:christain008
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目的:建立风寒湿型骨关节炎大鼠体内外模型,为“风寒湿致痹”这一中医病因病机理论提供实验基础.方法:动物模型的建立与评价方面,将SD大鼠随机分为空白组(Blank组)、膝骨关节炎组(KOA组)、风寒湿+膝骨关节炎组(FKOA组),采用改良Hulth法和人工气候箱模拟风寒湿环境构建风寒湿型膝骨关节炎动物模型,将FKOA组血清同时备用于体外研究,通过HE染色观察大鼠膝关节病理形态,ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6的含量.体外模型的建立与评价方面,通过分离、提取并培养原代软骨细胞,分为膝骨关节炎对照组(Control组,以IL-1β进行诱导)和风寒湿组(FHS组,以IL-1β进行诱导及FKOA组大鼠模型的血清干预).显微镜下观察软骨细胞形态,通过基因测序对比与骨关节炎发生发展相关的一些基因的表达情况,并着重检测Ⅱ型胶原蛋白α1(collagen typeⅡalpha 1,Col2a1)、蛋白多糖(aggrecan,Acan)、SRY相关高迁移率族盒蛋白转录因子9(SRY-related HMG box transcription factor 9,Sox9)mRNA表达的水平.结果:体内实验发现,与Blank相比较,其余2组的大鼠膝关节软骨细胞明显具有肥大化和成簇化表现,且FKOA组大鼠血清中IL-1β、IL-6含量较KOA组显著升高(P<0.05);体外实验中,相较Control组软骨细胞,加入风寒湿血清的软骨细胞形态学明显发生改变,多为扁平长梭形或不规则形,基因测序结果显示,与Control组比较,FHS组Col2a1、Acan、Sox9 mRNA的表达明显下降(P<0.01).结论:风寒湿因素处理后的膝骨关节炎大鼠加重了膝骨关节炎的病症特点,值得进一步研究与发掘.
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