【摘 要】
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背景与目的 去势抵抗性前列腺癌阶段的恩杂鲁胺耐药问题是临床上亟待解决的难题.本研究旨在建立一种可用于体外研究的人前列腺癌(prostate cancer,PCa)恩杂鲁胺(enzalutamide Enza)耐药细胞模型并筛选相关耐药基因.方法 采用MTT法检测雄激素非依赖的人PCa细胞株C4-2B的IC50值,确定Enza的初始处理浓度.然后,成倍增加Enza的初始浓度作用于C4-2B细胞,诱导建立PCa的Enza耐药细胞株(命名为C4-2B-ENZ).应用酶联免疫吸附测定(enzyme linked
【机 构】
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首都医科大学附属北京安贞医院泌尿外科,北京 100029,中国
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背景与目的 去势抵抗性前列腺癌阶段的恩杂鲁胺耐药问题是临床上亟待解决的难题.本研究旨在建立一种可用于体外研究的人前列腺癌(prostate cancer,PCa)恩杂鲁胺(enzalutamide Enza)耐药细胞模型并筛选相关耐药基因.方法 采用MTT法检测雄激素非依赖的人PCa细胞株C4-2B的IC50值,确定Enza的初始处理浓度.然后,成倍增加Enza的初始浓度作用于C4-2B细胞,诱导建立PCa的Enza耐药细胞株(命名为C4-2B-ENZ).应用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)、MTT法评估C4-2B-ENZ细胞株的耐药情况.采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)及蛋白质免疫印迹检测耐药细胞株mRNA和蛋白质的表达情况.在此基础上,通过裸鼠体内成瘤实验,ELISA法检测人前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)和人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平,免疫组化检测Ki67水平,进一步验证C4-2B-ENZ细胞的耐药性.最后,应用高通量芯片技术进一步筛选C4-2B与C4-2B-ENZ细胞差异表达的基因.结果 C4-2B细胞的IC50值为1.2μmol/L,C4-2B-ENZ细胞的IC50为14.77μmol/L,其耐药指数为12.4,属于中度耐药.蛋白质免疫印迹和PCR结果显示,与C4-2B细胞相比,C4-2B-ENZ细胞中Enza耐药基因CXCR7、AKT、STAT3、FOXP3的mRNA及蛋白质高表达,而AR、Jagged1、Notch1低表达.与C4-2B细胞异质瘤相比,耐药细胞C4-2B-ENZ异质瘤Enza处理后,瘤体生长曲线(P=0.0296)、瘤体质量(P<0.0001)、VEGF水平(P=0.0003)、PSA水平(P<0.0001)、Ki67胞核染色阳性率(P=0.0007)均显著升高.芯片筛选结果显示,与C4-2B细胞相比,C4-2B-ENZ细胞中有653个基因表达显著差异,其中211个基因表达上调,443个基因表达下调.结论 本研究建立了Enza耐药细胞模型并筛选出一些潜在的Enza耐药基因,为研究去势抵抗型前列腺癌耐药机制及药物靶点提供了研究线索.
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目的:探讨PDCA循环法在徐州医科大学附属徐州儿童医院药物临床试验机构资格认定中的作用.方法:根据PDCA循环理论,分析我院目前药物临床试验机构资格认定工作存在的问题,针对硬件建设、人员培训、制度建设制定相关对策并进行持续改进.结果:通过PDCA循环,我院资格认定申请工作取得了较好的成绩,机构办公室、伦理委员会及申请的10个专业全部通过资格认定.结论:PDCA循环法的应用在我院药物临床试验机构资格认定工作中发挥了积极的促进作用.
腺病毒感染在小儿呼吸道感染中占12％～20％[1],6个月～5岁儿童多见,其中部分发展为重症.腺病毒具有较广泛的组织易噬性,除累及呼吸系统外,还可引起咽结膜热、脑炎、肝炎、心肌炎、胃肠炎、尿路感染等,免疫功能不全患者可出现严重的侵袭性感染.重症腺病毒肺炎病情进展快,病死率高,腺病毒是导致肺炎患儿死亡的首要病原,部分存活患儿预后不良,14％～60％可遗留不同程度的后遗症[2].本文就重症腺病毒肺炎相关研究进展作一综述.
新生儿缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是由产时或孕晚期脑缺氧和缺血引起的脑损伤[1],能导致成人和儿童死亡或长期神经损伤[2-3],是全球儿童急性期死亡以及慢性神经损害的主要原因[4],也是全球足月和早产的新生儿围产期脑损伤主要的危险因素[5-7].围产期缺血和缺氧发生率为1‰～6‰,并且在新生儿HIBD中约40％的新生儿因HIBD死亡,还有30％的患儿遗留终身神经损伤[8-9],如脑瘫、癫痫、认知、行为、注意力、社交和学习困难等[10-12].
传染性软疣(molluscum contagiosum,MC)是由痘病毒家族的双链DNA传染性软疣病毒(molluscum contagio-sum virus,MCV)感染所致的常见良性传染性皮肤病[1].MCV属痘病毒,目前已发现4型及若干亚型,但以MCV-1型最常见[1].MC是世界上50种常见疾病之一[2],MC的传播是通过人与人之间皮肤的直接接触、间接接触和自我接种进行传播.病毒潜伏期为1周～6个月不等,通常为2～6周.临床上,MC以灰色或珍珠色、表面有蜡样光泽的半球形丘疹为特征,皮损直径通常为
支气管扩张是一种慢性化脓性呼吸道疾病,通过宿主、环境以及微生物的相互作用形成“恶性循环”,导致以反复感染、气道炎症和肺功能逐渐下降为特征的支气管不可逆性扩张[1-3].儿童支气管扩张常见的症状是慢性湿性咳嗽[1],以白色黏液性痰液为主,脓性、黄色和绿色痰液也占一定比例[3].支气管扩张包括两类,一类为囊性纤维化支气管扩张,另一类为非囊性纤维化支气管扩张,前者主要分布于欧洲、北美和澳大利亚[4],后者可分布于各种人群[5],本文仅讨论非囊性纤维化支气管扩张.无论是发达国家还是发展中国家,儿童支气管扩张是呼吸
1 病例资料rn患儿,女,2岁4个月,体质量13 kg,2019年11月5日因“发热1d”于重庆市儿童福利院儿康医院儿科门诊就诊,患儿既往身体健康,否认肝肾炎、结核、血液病、免疫性疾病史,否认药物、食物过敏史.入院前1d开始发热,为中低热,伴鼻塞、烦躁不安,无寒颤、抽搐、惊跳,偶有咳嗽、清涕,无呕吐、腹胀、腹泻.患儿精神、饮食欠佳,大小便未见明显异常.予以物理降温后仍反复发热,未给予药物治疗.血常规:白细胞计数(WBC)7.19×109/L、中性粒细胞(NEU)百分比56.9％、淋巴细胞(LYMPH)百分
儿科抗菌药物耐药现象日趋严峻,许多感染面临无药可用的窘境,氨基糖苷类是广谱杀菌抗菌药物,主要用于革兰阴性菌引起的感染,包括庆大霉素、阿米卡星等.2018年中国细菌耐药监测网(CHINET)细菌耐药性监测结果显示,碳青霉烯类耐药肠杆菌、肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌的检出率呈上升趋势;临床分离的肠杆菌科细菌对阿米卡星的敏感率达90％,对庆大霉素的敏感率达70％;肺炎克雷伯菌对阿米卡星的耐药率远低于碳青霉烯类,对庆大霉素的耐药率也远低于第三代和第四代头孢菌素;铜绿假单胞菌对阿米卡星和庆大霉素的耐药率分别为6.8％
早产儿呼吸暂停(apnea of prematurity,AOP)是早产儿常见的呼吸系统疾病,频繁的呼吸暂停会导致早产儿神经系统损害,影响患儿的近期及远期预后.咖啡因是临床预防和治疗AOP的一线药物,其用于治疗AOP已有40余年的历史,相比其他黄嘌呤类药物,咖啡因具有疗效好、半衰期长、不良反应少、给药方便及常规剂量下无需进行血药浓度监测等优点,现已成为治疗AOP的首选用药[1].随着咖啡因在AOP治疗中的广泛应用,近年来其对改善早产儿神经系统预后的作用逐渐引起新生儿学界的重视.目前动物实验及临床研究均显示
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吸入用复方异丙托溴铵溶液广泛应用于儿童哮喘及急性呼吸道疾病的治疗.吸入用复方异丙托溴铵溶液说明书提示尚无＜12岁患儿使用的研究,因此＜12岁患儿应用该药的安全性和有效性尚不明确.本研究回顾性分析1例支气管肺炎婴幼儿应用吸入用复方异丙托溴铵溶液后的不良反应发生情况,为临床安全用药提供参考.