慢病毒导入的CDC2582 siRNA对胰腺癌细胞CFPAC-1生物学行为的影响

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目的 利用已构建成功的、在人胰腺癌细胞株CFPAC-1中稳定抑制细胞分裂周期25同源体B(CDC2582)的重组慢病毒,建立CDC2582表达降低的细胞株,以研究该基因的作用.方法将产生CDC2582小干扰RNA(siRNA)分子的、携带绿色荧光蛋白的重组慢病毒感染CFPAC-1细胞后,用流式细胞仪筛选稳定表达的细胞株.应用RT-PCR和Western blot分别对细胞中CDC2582的mRNA和蛋白表达水平进行分析.应用MTT法、流式细胞仪、平板克隆形成和Transwell小室法分别检测其对细胞增殖、周期、细胞克隆形成能力和迁移侵袭能力的影响.结果 CDC2582 siRNA显著下调CFPAC-1细胞中CDC2582的表达,所构建的重组慢病毒导入的siRNA有较高的沉默效率,CFPAC-1细胞的增殖能力、克隆形成能力以及迁移侵袭能力显著增强,细胞周期无明显改变.结论 CDC2582基因可显著影响胰腺癌CFPAC-1细胞的增殖、克隆形成和迁移能力,为利用CDC2582所介导的信号通路进行肿瘤基因治疗提供了实验依据。

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