【摘 要】
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为了制备鸡干扰素调节因子7(interferon regulatory fator 7,IRF7)抗体,本研究通过分离鸡的外周血淋巴细胞,抽提RNA并反转录获得鸡淋巴细胞cDNA,利用聚合酶链式反应扩增获得
【机 构】
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扬州大学省部共建教育部禽类预防医学重点实验室,扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,教育部农业与农产品安全国际合作联合实验
【基金项目】
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国家重点研发计划项目(2016YFD0500800、2017YFD0501100);国家科技基础性工作专项(2013FY113300-4);国家自然基金项目(31472192);江苏高校优势学科建设工程资助项目
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为了制备鸡干扰素调节因子7(interferon regulatory fator 7,IRF7)抗体,本研究通过分离鸡的外周血淋巴细胞,抽提RNA并反转录获得鸡淋巴细胞cDNA,利用聚合酶链式反应扩增获得鸡IRF7基因(chIRF7),将该基因克隆入原核表达载体pCOLD-TF中,构建成pCOLD-TF-chIRF7原核表达质粒。将测序正确的表达质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,经0.25 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)低温诱导20 h。SDS-PAGE结果显示,融合蛋
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