【摘 要】
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目的 观察自噬在蛋白酶体抑制剂MG132诱导的食管鳞癌细胞死亡中的作用.方法 用20 μmol/L MG132和(或)5 mmol/L 3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理人食管鳞癌EC9706细胞,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)双染色流式细胞术检测细胞凋亡率；吖啶橙(AO)染色荧光显微镜观察细胞酸性自噬泡的变化；Western blot法检测自噬相关蛋白B
【机 构】
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450052郑州大学第一附属医院胸外科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室,450052郑州大学第一附属医院胸外科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室,郑州大学第一附属医院体检中心,45005
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目的 观察自噬在蛋白酶体抑制剂MG132诱导的食管鳞癌细胞死亡中的作用.方法 用20 μmol/L MG132和(或)5 mmol/L 3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理人食管鳞癌EC9706细胞,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)双染色流式细胞术检测细胞凋亡率；吖啶橙(AO)染色荧光显微镜观察细胞酸性自噬泡的变化；Western blot法检测自噬相关蛋白Beclin-1及凋亡相关蛋白半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-9的表达.结果 流式细胞仪检测示MG132、3-MA及MG132+ 3-MA组细胞凋亡率为(57.37±0.81)％、(9.43±0.15)％、(79.40±0.92)％.MG132组经吖啶橙染色后,细胞内酸性自噬泡明显增加,呈明亮的红色荧光,而加入3-MA联合作用后,则上述现象被抑制.Western blot结果示对照组、MG132、3-MA及MG132+ 3-MA组Beclin-1和Caspase-9相对灰度值分别为0.57 ±0.01、0.90 ±0.03、0.49 ±0.14、0.65±0.01和0.61±0.05、0.88±0.02、0.70 ±0.01、0.98±0.02.结论 MG132可以诱导食管鳞癌细胞凋亡,并可激活其自噬；3-MA可能通过上调Caspase-9的表达增强MG132对食管癌细胞的杀伤作用。
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目的 探讨兔脂肪间充质干细胞(ASCs)结合聚乳酸纤维膜修复尿道缺损的可行性.方法 分离和培养兔ASCs,鉴定表型.将24只兔随机分为A组或B组,A组采用兔ASCs结合聚乳酸纤维膜修复尿道缺损,B组用聚乳酸纤维膜修复.术后4、6周切取尿道标本,行组织学检查,观察术后膀胱形态,比较差异.结果 细胞表型为:CD44阳性,CD45和CD105阴性,符合兔ASCs特征.A组尿道可见正常尿道样组织而B组平滑
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