【摘 要】
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目的 通过慢病毒转染C6胶质瘤细胞建立稳定表达绿色荧光蛋白(EGFP)的C6细胞株.方法 用含2个启动子延长因子-1α(EF-1α)和CMV的慢病毒转染C6胶质瘤细胞,荧光显微镜下观察表达EGFP的C6细胞,噻唑蓝(MTT)法比较C6和EGFP-C6胶质瘤细胞生长曲线;建立裸鼠皮下和大鼠颅内胶质瘤模型评价其致瘤性,测量肿瘤体积、苏木素-伊红(HE)染色、免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP
【机 构】
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450052郑州大学第一附属医院神经外科,450052郑州大学第一附属医院神经外科,郑州大学附属郑州中心医院放射科,河南省红十字血液中心,河南省医学科学院,450052郑州大学第一附属医院神经外科
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目的 通过慢病毒转染C6胶质瘤细胞建立稳定表达绿色荧光蛋白(EGFP)的C6细胞株.方法 用含2个启动子延长因子-1α(EF-1α)和CMV的慢病毒转染C6胶质瘤细胞,荧光显微镜下观察表达EGFP的C6细胞,噻唑蓝(MTT)法比较C6和EGFP-C6胶质瘤细胞生长曲线;建立裸鼠皮下和大鼠颅内胶质瘤模型评价其致瘤性,测量肿瘤体积、苏木素-伊红(HE)染色、免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色、磁共振成像(MRI)监测肿瘤体积.结果 在倒置和荧光显微镜下观察EGFP-C6细胞形态与C6细胞相似,MTF方法检测其细胞增殖能力(0.53±0.02)与C6细胞(0.51±0.01)相似,裸鼠皮下模型结果表明C6细胞和EGFP-C6细胞的肿瘤体积[(2.20±0.91) cm3比(2.10 ±0.84) cm3]、HE染色、GFAP的表达未见明显区别,并且颅内模型结果也表明,C6细胞和EGFP-C6细胞的肿瘤体积[(19.5±2.3)cm3比(20.5±2.3) cm3]、荷瘤鼠生存期、成瘤率及颅外转移率未见明显区别.结论 成功建立以EGFP为生物标记的C6细胞株,其生物学特性与C6细胞相似。
其他文献
目的 构建人肿瘤裸鼠移植瘤模型,探讨多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白3(LRIG3)表达沉默后对移植瘤生长以及表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响.方法 将Hela229细胞接种于裸鼠背部皮下,成瘤后将裸鼠分为3组,分别在瘤体内注射生理盐水、LRIG3反义寡核苷酸(ASODN)、LRIG3错义寡核苷酸(MSODN),检测各组移植瘤生长以及LRIG3和EGFR表达.结果 ASOND组较其他两组瘤体生
目的 观察大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)模型基底动脉蛋白酶激活受体1(PARl)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的变化,探讨PAR1、TNF-α与脑血管痉挛(CVS)之间的关系.方法 采用枕大池二次注血的方法,建立大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛模型.实验动物分组:正常组、SAH 3 d组、SAH 5 d组、SAH 7 d组.模型制作成功后灌杀大鼠,取基底动脉标本行组织学检查,计算机软件测量各
近年来,国外多个肾移植中心报道人类细小病毒B19(HPV B19)的感染是患者术后严重贫血的主要原因,同时有可能导致移植肾的慢性损伤[1].本研究旨在观察肾移植受者感染人类细小病毒B19后对T淋巴细胞的影响.一、材料与方法1.一般资料:收集2010年5月至2013年3月因终末期肾病进行同种异体肾移植受者133例,其中男89例,女44例,中位年龄40(18 ～65)岁.活体供肾53例,尸体供肾80例
本实验旨在探讨改良Paul-Mikulicz回肠造口术模型的可行性和有效性,从而更为方便的获取移植物样本而不干扰肠道连续性.一、材料和方法1.材料:20只雄性台湾Lan-Yu小猪.2.麻醉:肌肉注射氯胺酮(10 mg/kg)和阿托品(0.2 kg/kg)麻醉诱导.行气管插管,机械通气.吸入2％的异氟烷维持麻醉.3.小肠移植:在移植时,供体的肠系膜上动脉、肠系膜上静脉分别与受体肾动脉下主动脉和肠系膜
目的 探讨肝再生磷酸酶-3(PRL-3)对丝氨酸蛋白酶抑制剂E3(serpinE3)的影响及机制,以及PRL-3和serpinF3对结肠癌Lovo细胞侵袭性的影响.方法 通过Western blot方法,分别检测已经稳转入PRL-3载体的Lovo-P细胞和对照组Lovo-C细胞中serpinE3的表达水平,Transwell小室检测Lovo细胞侵袭性.再给予细胞外调节蛋白激酶(ERK)特异性抑制剂
椎体骨折通常是由于老年人的骨质疏松而引起[1-13].骨质疏松型椎体压缩骨折在当今人口老龄化日益严重的年代越来越常见,伴随而来的是疼痛、活动受限、椎体的塌陷畸形以及一系列长期卧床引发的并发症[14-15,妥善地解决这一问题早已成为课题,其中椎体成形术(VP)及椎体后凸成形术(KP)作为治疗椎体压缩骨折的有效方法[1-7,[10-11,13-14,16-23],已被全世界广泛应用.为减少术后并发症,
酪氨酸激酶受体B(TrkB)与脑源性神经营养因子(BDNF)结合后能激活多个重要的信号传导通路,包括丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径、磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸-苏氨酸激酶(PI3K/Akt)途径和磷脂酶C(PLC)途径[1].我们采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测TrkB-BDNF及其3条下游信号通路对神经母细胞瘤(NB)的转移侵袭的影响.一、材料和方法1.材料:NB细胞株SH-SY5
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