【摘 要】
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根据透明质酸合酶基因序列及内参照GAPDH基因序列 ,设计目的基因和内参照的引物序列 ,探讨了PCR体系中适宜的退火温度、循环次数和Mg2 + 浓度。实验结果显示 ,要保证半定量RT
【机 构】
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山东福瑞达生物化工有限公司,山东省生物药物研究院,山东大学药学院生化与生物技术药物研究所
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根据透明质酸合酶基因序列及内参照GAPDH基因序列 ,设计目的基因和内参照的引物序列 ,探讨了PCR体系中适宜的退火温度、循环次数和Mg2 + 浓度。实验结果显示 ,要保证半定量RT -PCR的准确性与可靠性 ,目的基因及内参照基因的退火温度均可选择 5 0℃ ,它们的Mg2 + 浓度均选择 1.5mmol L ,目的基因的循环次数选择 30次 ,内参照基因的循环次数选择 35次。在上述适宜的RT -PCR条件下 ,测定兽疫链球菌中透明质酸合酶mRNA水平。
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