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目的 探讨慢病毒介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因/丙氧鸟苷体系(HSV-tk/GCV)对人晶状体上皮细胞(LECs)系的杀伤效应的机制.方法 HSV-tk基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因共表达的慢病毒感染细胞为试验组,仅表达EGFP的慢病毒感染细胞和正常细胞为对照组.流式细胞仪检测病毒的转染效率,荧光显微镜观察及基因组PCR和RT-PCR检测基因在LECs内表达,DNA ladder和电镜观察该系统对LECs的杀伤作用,检测HSV-tk/GCV系统的浓度时间依赖性和旁观者效应.结果 HSV-tk整合入LECs并高效表达.10～25μg/ml的GCV能明显诱导转染HSV-tk的细胞凋亡或坏死,且随GCV浓度升高和作用时间延长效应增强,且存在明显的旁观者效应,而对照组细胞无显著改变.当GCV浓度＞25μg/ml,对照组细胞的增殖也被显著抑制.结论 GCV可高效杀伤表达HSV-tk的LECs,且旁观者效应显著增强了HSV-tk/GCV系统的杀伤效果.HSV-tk和EGFP共表达的慢病毒载体能高效稳定转染LECs.(中华眼科杂志,2007,43:810-816)