【摘 要】
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农杆菌介导的遗传转化的生物技术已经被广泛应用。蚜传辅助因子(helper component-proteinase,HC-Pro)是一种RNA沉默抑制子,而HC-Pro蛋白对植物基因组DNA甲基化的影响及其作
【机 构】
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1吉林师范大学生命科学学院, 四平, 136000; 2吉林省植物资源科学与绿色生产重点实验室, 四平, 136000;
【基金项目】
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本研究由吉林省科技发展计划青年科研基金项目(20130522182JH)、国家青年科学基金项目(31301043)和吉林省教育厅项目吉教科合字([2015]项目编号: 231)共同资助。
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农杆菌介导的遗传转化的生物技术已经被广泛应用。蚜传辅助因子(helper component-proteinase,HC-Pro)是一种RNA沉默抑制子,而HC-Pro蛋白对植物基因组DNA甲基化的影响及其作用机制并不十分清楚。我们采用农杆菌介导的烟草(Nicotiana benthamiana L.)叶盘转化法将外源基因HC-Pro转化烟草。并优化了各种侵染条件,包括农杆菌重悬液的浓度,选择培养基中卡那霉素的浓度和生根培养基中活性炭的比例。此外,我们介绍了一种简单而有效的生根技术,即水培生根法,并利用这种技术快速获得了HC-Pro转基因株系。半定量RT-PCR(Reverse transcription-PCR)检测结果表明,HC-Pro在转基因烟草及转基因后代植株中稳定表达,为HC-Pro蛋白功能的研究提供了实验帮助。
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