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摘要: 总黄酮是药材中普遍存在的化学成份，也是有效成分。本文以秦岭龙胆中总黄酮的提取工艺研究进展为例，旨在为中药材中总黄酮的提取分离工艺提供理论依据，为中药材中总黄酮的开发利用提供参考。
关键词: 总黄酮；提取工艺；研究进展
【中图分类号】R282
【文献标识码】B
【文章编号】2236-1879(2017)08-0261-02
秦岭龙胆为龙胆科龙胆属植物(Gentiana apiata N. E. Brown)的干燥根茎，别名茱苓草，是陕西秦岭特有中草药。其药性苦、平，归肝、胆、膀胱经。有调经活血，清热明目，利小便的功效，主治月经不调，痛经，头晕失眠，小便不利，淋症，崩漏，白带，痢疾，腹痛［1］。黄酮作为秦岭龙胆药材当中一种很重要的活性成分，具有抗氧化、抗衰老、抗病毒、抗菌、抗辐射等药理作用［2］，而且在人体内直接不能合成，只能从食品中获得。因此黄酮类化合物活性成分的提取研究已成为进一步加工保健食品和药品的热点。本文对秦岭龙胆中总黄酮的提取工艺进行综述，旨在为秦岭龙胆及其他药材中黄酮成分的开发利用提供参考。
1溶剂提取法
黄酮类化合物种类多由于结构和来源不同性质差异很大，需要根据其极性和溶解性。选择不同溶剂进行提取，一般黄酮苷元不溶或难溶于水，易溶于甲醇或乙醇等有机溶剂或稀碱溶液。黄酮苷类易溶于热水、甲醇、乙醇、稀碱溶液。因此常用甲醇、乙醇、水、稀碱溶液作为提取溶剂。如浓度为90%或95%的乙醇提取苷元60%的乙醇提取苷类，热水常提取苷类，秦岭龙胆中总黄酮极性较大所以采取乙醇回流提取，可以溶解于甲醇或乙醇有机溶剂或稀碱溶液中；常采用石油醚除去杂质，乙酸乙酯提取苷。高效简便，易于操作 。所以选取乙醇回流提取秦岭龙胆总黄酮。
2超声波提取法
超声波提取法［3-5］不仅仅具有节省溶剂、操作简单、提取效率高、而且用时短，不用加热以及使用有效成分最大溶出等特点，它通常破坏啦细胞壁的结构使黄酮有效成分从中流出。从而使得得率提高的一种方法。刘娟［6］等用超声法提取大黄总黄酮，通过单因素和正交实验法确立最佳提取工艺为超声温度60℃，固液比30倍，超声时间60min，超声提取次数4次，黄酮得率3.55%。
3微波辅助提取法
微波提取法提取起来速度快，节省溶剂的使用量，能最大限度的使有效成分溶出环保等优点。王艺帷［7］采用微波辅助，乙醇沉淀法提取薄荷总黄酮，经响应面优化法确定最佳工艺为：料液比1：8(g/mL)，提取时间30min，提取温度90℃。经实验验证提取率为1.13%。
4超临界流体萃取技术
在以下这些物质如二氧化碳、一氧化氮、甲醇、水、等都可以做超临界流体的物质。由于SC-CO2有较低临界常数Tc=31.1℃，Pc=7.38MPa用它萃取的温度较低不会使藥用成分受热而分解。且二氧化碳还无毒，不易挥发和无溶剂残留等特点［8］。医学诊断的超声波频率为1兆赫兹至30兆赫兹。它的方向性好，穿透能力强，易于获得较集中的声能，在水中传播距离远，可用于测距、测速、清洗、焊接、碎石、杀菌消毒等。在医学、军事、工业、农业上有很多的应用。
5酶解法
利用酶反应的高度专一性的性质，将植物细胞壁水解或降解，使细胞壁内的黄酮溶出。陈红［9］等研究报道如果仅仅只是用单一的超声进行提取则提取率较低，但如果在超声提取同时在加入酶辅助提取，则黄酮的得率将会得到提升，黎国庆［10］采用微波协同酶法提取薄荷总黄酮并对其工艺进行优化，通过单因素试验和正交试验，确定微波协同酶法提取的最佳工艺条件：微波功率500W、 微波处理时间2 min、液料比30：1(mL /g)、纤维素酶用量1.5%、酶解温度50℃、酶解时间40min，pH5.0，在此工艺条件下，黄酮提取率为8.12%。
6双水相萃取法
双水相萃取法是利用物质在互不相容的两项水之间分配系数的差异进行萃取的一种新型分离技术，它具有使用溶剂环保、分离效率高、操作条件温和等优点［10］。
7半仿生提取法
半仿生提取法［11-12］是对口服药物在胃肠吸收的过程的一种模拟，在药物中首先加入酸溶液(一定PH)提取。再加碱溶液(一定PH)提取，然后将两次的提取液合并，最后过滤，减压浓缩得到粗提取物的方法。这个有利于节约成本，节能等特点。黄酮类成份在碱性条件下易于溶出是由于其结构中含有大量酚羟基，显弱酸性，利用这个性质采用碱提酸沉的方法。
从本文可看出黄酮的提取方法有传统提取法和现代提取法，在提取总黄酮的过程中可以根据药材的性质及所含成分等选择合适的提取方法，最大限度的把总黄酮提取出来。
参考文献
［1］周乐，王宁，杨伟霞等. 秦岭龙胆的化学成分研究［J］. 西北农林科技大学学报：自然科学版，2014， 15(8)： 36-37.
［2］张育光. Box-Behnken响应面设计优化微波辅助提取大豆胚芽黄酮的工艺［J］.中国中医药现代远程教育， 2013， 5(2)：34-35.
［3］王宁. 秦岭龙胆化学成分的定性分析［J］. 青海大学学报(自然科学版)，2004，(06)：1-2.
［4］吴海成. 玉米须甾醇的提取纯化及抑菌活性［D］. 吉林大学， 2013.
［5］刘清荣. 李兴科.王军等超声振动辅助铣削加工技术及机理研究［J］. 劳动保障世界： 理论版， 2014，7 (01)： 78-79.
［6］刘娟， 丁长江， 刘磊. 响应面法优化超声波循环提取长裙竹荪抗氧化物质工艺研究［J］. 食品科学， 2000， 3(6)： 35-36.
［7］王艺帷，崔震昆，赵永春. 龙胆黄酮的制备方法及化学组成的研究［J］. 农产品加工(学刊)，2008，05(7)：34-36.
［8］陈红， 张艳荣， 王大为， 等. 微波协同酶法提取龙胆黄酮工艺的优化研究［J］. 食品科学， 2010，12 (10)： 42-46
［9］陈红. 建宁莲子芯中黄酮的提取， 分离及结构研究［D］. 福建农林大学， 2010
［10］黎国庆， 李盛宣， 覃江克， 等. 油茶枯中皂素和黄酮的综合提取工艺研究［J］. 中国油脂， 2014， 39(3)： 70-73
［11］王艺帷，唐艳花，吴娜，王静. 响应曲面法优化龙胆黄酮提取工艺的研究［J］. 云南化工，2015，01(2)：1-5.
［12］文洪宇， 李洪， 杨娟， 等. 酶解技术在中药提取分离中的应用进展［D］. 2007 年中华中医药学会第八届中药鉴定学术研讨会， 2007 年中国中西医结合学会中药专业委员会全国中药学术研讨会论文集， 2007，2(5)：46-53.
指导教师简介：许海燕（1977-），女,讲师,研究方向：中药化学成分提取与分离研究，E-mail:xpzwd@126.com ，电话：15769201632
基金项目：陕西省科技厅项目（编号：2016SF-378）。名称：秦岭龙胆挥发油提取-纯化及其药理活性研究；
国家级大学生创新创业训练计划项目（编号：201513123819）；
陕西省大学生创新创业训练计划项目（编号：2508）。名称：秦岭龙胆总黄酮提取工艺研究
关键词: 总黄酮；提取工艺；研究进展
【中图分类号】R282
【文献标识码】B
【文章编号】2236-1879(2017)08-0261-02
秦岭龙胆为龙胆科龙胆属植物(Gentiana apiata N. E. Brown)的干燥根茎，别名茱苓草，是陕西秦岭特有中草药。其药性苦、平，归肝、胆、膀胱经。有调经活血，清热明目，利小便的功效，主治月经不调，痛经，头晕失眠，小便不利，淋症，崩漏，白带，痢疾，腹痛［1］。黄酮作为秦岭龙胆药材当中一种很重要的活性成分，具有抗氧化、抗衰老、抗病毒、抗菌、抗辐射等药理作用［2］，而且在人体内直接不能合成，只能从食品中获得。因此黄酮类化合物活性成分的提取研究已成为进一步加工保健食品和药品的热点。本文对秦岭龙胆中总黄酮的提取工艺进行综述，旨在为秦岭龙胆及其他药材中黄酮成分的开发利用提供参考。
1溶剂提取法
黄酮类化合物种类多由于结构和来源不同性质差异很大，需要根据其极性和溶解性。选择不同溶剂进行提取，一般黄酮苷元不溶或难溶于水，易溶于甲醇或乙醇等有机溶剂或稀碱溶液。黄酮苷类易溶于热水、甲醇、乙醇、稀碱溶液。因此常用甲醇、乙醇、水、稀碱溶液作为提取溶剂。如浓度为90%或95%的乙醇提取苷元60%的乙醇提取苷类，热水常提取苷类，秦岭龙胆中总黄酮极性较大所以采取乙醇回流提取，可以溶解于甲醇或乙醇有机溶剂或稀碱溶液中；常采用石油醚除去杂质，乙酸乙酯提取苷。高效简便，易于操作 。所以选取乙醇回流提取秦岭龙胆总黄酮。
2超声波提取法
超声波提取法［3-5］不仅仅具有节省溶剂、操作简单、提取效率高、而且用时短，不用加热以及使用有效成分最大溶出等特点，它通常破坏啦细胞壁的结构使黄酮有效成分从中流出。从而使得得率提高的一种方法。刘娟［6］等用超声法提取大黄总黄酮，通过单因素和正交实验法确立最佳提取工艺为超声温度60℃，固液比30倍，超声时间60min，超声提取次数4次，黄酮得率3.55%。
3微波辅助提取法
微波提取法提取起来速度快，节省溶剂的使用量，能最大限度的使有效成分溶出环保等优点。王艺帷［7］采用微波辅助，乙醇沉淀法提取薄荷总黄酮，经响应面优化法确定最佳工艺为：料液比1：8(g/mL)，提取时间30min，提取温度90℃。经实验验证提取率为1.13%。
4超临界流体萃取技术
在以下这些物质如二氧化碳、一氧化氮、甲醇、水、等都可以做超临界流体的物质。由于SC-CO2有较低临界常数Tc=31.1℃，Pc=7.38MPa用它萃取的温度较低不会使藥用成分受热而分解。且二氧化碳还无毒，不易挥发和无溶剂残留等特点［8］。医学诊断的超声波频率为1兆赫兹至30兆赫兹。它的方向性好，穿透能力强，易于获得较集中的声能，在水中传播距离远，可用于测距、测速、清洗、焊接、碎石、杀菌消毒等。在医学、军事、工业、农业上有很多的应用。
5酶解法
利用酶反应的高度专一性的性质，将植物细胞壁水解或降解，使细胞壁内的黄酮溶出。陈红［9］等研究报道如果仅仅只是用单一的超声进行提取则提取率较低，但如果在超声提取同时在加入酶辅助提取，则黄酮的得率将会得到提升，黎国庆［10］采用微波协同酶法提取薄荷总黄酮并对其工艺进行优化，通过单因素试验和正交试验，确定微波协同酶法提取的最佳工艺条件：微波功率500W、 微波处理时间2 min、液料比30：1(mL /g)、纤维素酶用量1.5%、酶解温度50℃、酶解时间40min，pH5.0，在此工艺条件下，黄酮提取率为8.12%。
6双水相萃取法
双水相萃取法是利用物质在互不相容的两项水之间分配系数的差异进行萃取的一种新型分离技术，它具有使用溶剂环保、分离效率高、操作条件温和等优点［10］。
7半仿生提取法
半仿生提取法［11-12］是对口服药物在胃肠吸收的过程的一种模拟，在药物中首先加入酸溶液(一定PH)提取。再加碱溶液(一定PH)提取，然后将两次的提取液合并，最后过滤，减压浓缩得到粗提取物的方法。这个有利于节约成本，节能等特点。黄酮类成份在碱性条件下易于溶出是由于其结构中含有大量酚羟基，显弱酸性，利用这个性质采用碱提酸沉的方法。
从本文可看出黄酮的提取方法有传统提取法和现代提取法，在提取总黄酮的过程中可以根据药材的性质及所含成分等选择合适的提取方法，最大限度的把总黄酮提取出来。
参考文献
［1］周乐，王宁，杨伟霞等. 秦岭龙胆的化学成分研究［J］. 西北农林科技大学学报：自然科学版，2014， 15(8)： 36-37.
［2］张育光. Box-Behnken响应面设计优化微波辅助提取大豆胚芽黄酮的工艺［J］.中国中医药现代远程教育， 2013， 5(2)：34-35.
［3］王宁. 秦岭龙胆化学成分的定性分析［J］. 青海大学学报(自然科学版)，2004，(06)：1-2.
［4］吴海成. 玉米须甾醇的提取纯化及抑菌活性［D］. 吉林大学， 2013.
［5］刘清荣. 李兴科.王军等超声振动辅助铣削加工技术及机理研究［J］. 劳动保障世界： 理论版， 2014，7 (01)： 78-79.
［6］刘娟， 丁长江， 刘磊. 响应面法优化超声波循环提取长裙竹荪抗氧化物质工艺研究［J］. 食品科学， 2000， 3(6)： 35-36.
［7］王艺帷，崔震昆，赵永春. 龙胆黄酮的制备方法及化学组成的研究［J］. 农产品加工(学刊)，2008，05(7)：34-36.
［8］陈红， 张艳荣， 王大为， 等. 微波协同酶法提取龙胆黄酮工艺的优化研究［J］. 食品科学， 2010，12 (10)： 42-46
［9］陈红. 建宁莲子芯中黄酮的提取， 分离及结构研究［D］. 福建农林大学， 2010
［10］黎国庆， 李盛宣， 覃江克， 等. 油茶枯中皂素和黄酮的综合提取工艺研究［J］. 中国油脂， 2014， 39(3)： 70-73
［11］王艺帷，唐艳花，吴娜，王静. 响应曲面法优化龙胆黄酮提取工艺的研究［J］. 云南化工，2015，01(2)：1-5.
［12］文洪宇， 李洪， 杨娟， 等. 酶解技术在中药提取分离中的应用进展［D］. 2007 年中华中医药学会第八届中药鉴定学术研讨会， 2007 年中国中西医结合学会中药专业委员会全国中药学术研讨会论文集， 2007，2(5)：46-53.
指导教师简介：许海燕（1977-），女,讲师,研究方向：中药化学成分提取与分离研究，E-mail:xpzwd@126.com ，电话：15769201632
基金项目：陕西省科技厅项目（编号：2016SF-378）。名称：秦岭龙胆挥发油提取-纯化及其药理活性研究；
国家级大学生创新创业训练计划项目（编号：201513123819）；
陕西省大学生创新创业训练计划项目（编号：2508）。名称：秦岭龙胆总黄酮提取工艺研究