【摘 要】
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目的:探究金丝桃苷(HYP)对颅内动脉瘤(IA)大鼠血管内皮损伤的影响及其可能的分子机制.方法:SD大鼠随机选取12只为假手术组(Sham组),其余大鼠采用结扎双侧肾动脉后支和左颈总动脉方法建立IA模型.建模成功后将大鼠分为模型组(IA组)、HYP低(HYP-L组,50mg· kg-1 HYP)、高(HYP-H组,100 mg·kg-1 HYP)剂量组、HYP+ Hippo抑制剂组(HYP+XMU-MP-1组,100mg·kg-1 HYP+1 mg·kg-1 XMU-MP-1),每组12只.HYP各剂量组
【机 构】
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山东大学齐鲁医院南山分院神经外科 山东龙口265700
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目的:探究金丝桃苷(HYP)对颅内动脉瘤(IA)大鼠血管内皮损伤的影响及其可能的分子机制.方法:SD大鼠随机选取12只为假手术组(Sham组),其余大鼠采用结扎双侧肾动脉后支和左颈总动脉方法建立IA模型.建模成功后将大鼠分为模型组(IA组)、HYP低(HYP-L组,50mg· kg-1 HYP)、高(HYP-H组,100 mg·kg-1 HYP)剂量组、HYP+ Hippo抑制剂组(HYP+XMU-MP-1组,100mg·kg-1 HYP+1 mg·kg-1 XMU-MP-1),每组12只.HYP各剂量组大鼠灌胃给予相应剂量的HYP,1次/d;HYP+XMU-MP-1组大鼠于每日灌胃给予HYP的同时,每2d腹腔注射1 mg·kg-1 XMU-MP-1,连续给药8周.ELISA检测血清炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)、一氧化氮(NO)及血管内皮损伤标志物血管内皮生长因子(VEGF)、内皮素1(ET-1)水平;Elastica van Gieson染色检测动脉瘤和内部弹性层破裂的大小、壁厚比及动脉瘤腔面积;HE染色观察IA血管组织病理学变化;逆转录定量PCR(RT-qPCR)检测IA血管组织巨噬细胞趋化蛋白1(MCP-1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA表达;Western blot检测IA血管组织Hippo信号通路相关蛋白[哺乳动物Ste-20样激酶(MST) 1/2、p-MST1/2、Yes相关蛋白(YAP)、p-YAP、大型肿瘤抑制因子(LATS) 1/2]表达.结果:与Sham组相比,IA组大鼠血清NO、IA血管组织eNOS mRNA表达水平和p-MST1/2/MST1/2、p-LATS1/2/LATS1/2比值明显降低(P＜0.05),血清TNF-α、IL-6、VEGF、ET-1、IA血管组织MCP-1、VCAM-1、iNOS和MMP-9 mRNA表达水平和p-YAP/YAP比值明显升高(P＜0.05),颅底Willis环上有明显突起,动脉瘤、内部弹性层破裂的大小和动脉瘤腔面积明显增加(P＜0.05),动脉血管内皮细胞出现空泡样变性,大量炎性细胞浸润;与IA组相比,HYP-L、HYP-H组大鼠血清NO、IA血管组织eNOS mRNA表达水平和p-MST1/2/MST1/2、p-LATS 1/2/LATS1/2比值明显升高(P＜0.05),血清TNF-α、IL-6、VEGF、ET-1、IA血管组织MCP-1、VCAM-1、iNOS和MMP-9 mRNA表达水平和p-YAP/YAP比值明显降低(P＜0.05),Willis环上的突起明显减小,动脉瘤、内部弹性层破裂的大小和动脉瘤腔面积明显降低(P＜0.05),壁厚比明显增加(P＜0.05),动脉血管内皮细胞空泡样变性和炎性细胞浸润明显减轻;使用MST1/2抑制剂XMU-MP-1可明显升高p-YAP/YAP比值,减弱HYP对IA大鼠动脉血管内皮组织损伤的保护作用.结论:HYP可降低血管炎症因子水平,有效改善IA大鼠动脉血管内皮功能,其作用机制可能与激活Hippo信号通路,抑制YAP入核有关.
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