【摘 要】
：
采用RT-PCR方法扩增狂犬病病毒(RV)FluryLEP毒株N基因,将该片段克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,测序验证后将阳性重组质粒转化至宿主菌E.coliBL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,进
【机 构】
：
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室;
【基金项目】
：
国家高技术研究发展计划(863)项目(2008AA10Z411);国家“十一五”科技支撑计划项目(2006BAD6A13-4);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0032007008)
论文部分内容阅读
采用RT-PCR方法扩增狂犬病病毒(RV)FluryLEP毒株N基因,将该片段克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,测序验证后将阳性重组质粒转化至宿主菌E.coliBL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE和Western-blot分析。结果显示,RVN蛋白以包涵体形式表达,大小约为70ku,且该重组N蛋白具有良好的反应原性。用纯化的重组N蛋白作为诊断抗原建立了检测犬、猫RV抗体的间接ELISA方法,通过优化反应条件,确定抗原的最佳包被浓度为6μg/mL,血清最佳稀释度为1:200,SPA-HRP的最佳稀释度为1:2000。用该间接ELISA方法与以狂犬病病毒作为诊断抗原的商品化ELISA试剂盒分别对30份临床血清样品进行检测,结果两者的符合率为96.67%。表明基于重组N蛋白的间接ELISA方法可用于检测犬、猫RV抗体水平。
其他文献
<正>失业预警系统是根据获取的失业动态监测数据,就业、失业相关统计数据,宏观经济相关数据进行综合分析,用以判断本区域管辖内失业预警级别状况,对未来可能出现的变化趋势进
政府采购是目前世界各国规范公共资金使用、调节经济运行、维护本国利益的基本制度。由于政府采购制度的快速发展以及国际贸易一体化和自由化程度的逐渐提高,发达国家极力推
传统小学英语教学往往只重视听、说、读、写能力的培养,忽略英语教学中德育渗透的重要性与必要性。针对我国小学生的道德现状,现行的《英语教学大纲》强调:教师在传授英语知
综述了近年来棒状、盘片、光纤和热容等高平均功率全固态激光器的进展和国内近期的工作。围绕限制激光器输出平均功率提高和激光光束质量下降的热效应问题,比较了各类激光器
企业文化是企业生存发展的重要战略资源,是构成企业竞争力的最具战略性、基础性和决定性的要素。在经济全球化和知识经济的时代背景下,企业的国际、国内竞争日益激烈,培育出
<正>近几年,我地区开展的南美白对虾养殖出现了一些新问题:池塘单养模式发病率高且难以控制,与罗氏沼虾混养,南美白对虾的产量往往低于罗氏沼虾的产量、对控制病害发生的效果
浙东学派的涵义及浙东学术精神杨太辛从南宋到明清的浙东学术是中国学术史上极其光采的一页，也是堪称光辉的浙东文化的精神命脉所在。对于浙东学术的杰出人物王阳明和黄宗羲的
本文是在对船舶应急电力系统进行充分理论研究与分析的基础上,依据中国船级社《钢质海船入级规范》对船舶应急电力系统的相关规定,结合实船要求进行的《船舶应急电站自动控制
目的:运用PCR体外扩增法获取弓形虫表面抗原SAG3和SAG1目的基因片段,构建重组表达质粒pET29a(+)-SAG3和pET29a(+)-SAG1,分别在大肠埃希菌(Escherichia coli)中诱导表达SAG3和
肺癌耐药是导致化疗失败的主要原因。研究发现肿瘤细胞耐药的分子机制很复杂,除了药物进入肿瘤细胞内浓度减少外,靶基因突变、扩增、DNA断裂修复加速、细胞抗/促凋亡基因表达