【摘 要】
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目的 探究慢性间歇性低氧（CIH）通过血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）-AngⅡ1型受体（AT1R）对小鼠Lewis肺癌（LLC）细胞迁移的影响以及相关机制。方法 将20只小鼠随机分为常氧对照组（10只）和CIH组（10只）。用常氧和CIH处理后的LLC细胞皮下成瘤小鼠血清配制成完全培养基来培养LLC细胞，检测LLC细胞形态。Transwell检测不同处理方法对LLC细胞迁移的影响；蛋白质印迹法检测LLC
【机 构】
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新乡医学院第一附属医院生命科学研究中心
【基金项目】
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河南省医学科技攻关省部共建重点项目（SBGJ202102188）； 新乡市科技攻关计划项目（GG2020027）； 新乡医学院研究生科研创新计划支持项目（YJSCX202012Z）；
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目的 探究慢性间歇性低氧（CIH）通过血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）-AngⅡ1型受体（AT1R）对小鼠Lewis肺癌（LLC）细胞迁移的影响以及相关机制。方法 将20只小鼠随机分为常氧对照组（10只）和CIH组（10只）。用常氧和CIH处理后的LLC细胞皮下成瘤小鼠血清配制成完全培养基来培养LLC细胞，检测LLC细胞形态。Transwell检测不同处理方法对LLC细胞迁移的影响；蛋白质印迹法检测LLC细胞迁移相关信号蛋白水平的影响；酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测小鼠血清与LLC细胞培养基上清中AngⅡ水平。结果 ELISA结果显示，CIH组小鼠血清中AngⅡ的水平升高，t=13.948,P=0.008。不同处理方法小鼠血清培养LLC细胞结果显示，CIH组小鼠血清促进LLC细胞形态由上皮样转化为间充质样。Transwell结果显示，Losartan拮抗CIH组小鼠血清对LLC细胞迁移有促进作用，CIH的主效应为F=22.667,P=0.001,Los的主效应为F=29.706,P=0.001,CIH与Los二者间存在交互拮抗效应，F=10.303,P=0.012。用AngⅡ处理LLC细胞后发现，AngⅡ促进LLC细胞形态由上皮样转化为间充质样，Transwell结果显示，AngⅡ以浓度依赖性的方式促进LLC细胞迁移，F=42.497,P=0.003。AngⅡ以及AngⅡ联合使用AT1R拮抗剂Losartan处理LLC细胞，Transwell结果显示，Losartan拮抗AngⅡ对LLC细胞迁移有促进作用，F=53.432,P＜0.001;蛋白质印迹结果显示，Losartan拮抗AngⅡ对vimentin（F=77.819,P=0.001）、MMP 2（F=49.363,P=0.001）、β-catenin（F=23.847,P＜0.001）和p-Akt/Akt（F=58.608,P=0.007）水平有促进作用。AngⅡ以及AngⅡ联合使用PI3K阻断剂LY294002处理LLC细胞后，Transwell结果显示，LY294002拮抗AngⅡ对LLC细胞迁移有促进作用，F=52.792,P=0.002;蛋白质印迹结果显示，LY294002拮抗AngⅡ对vimentin（F=94.231,P=0.032）、MMP 2（F=48.612,P=0.020）、β-catenin（F=46.037,P＜0.001）和p-Akt/Akt（F=19.644,P=0.002）水平有促进作用。进一步给予LLC细胞间歇性低氧（IH）以及IH联合Losartan处理，ELISA结果显示，IH提高LLC细胞培养基上清液中AngⅡ水平，t=5.022,P＜0.001;Transwell结果显示，Losartan拮抗IH对LLC细胞迁移有促进作用，IH的主效应为F=84.587,P＜0.001, Los的主效应为F=92.102,P＜0.001,IH与Los二者的交互拮抗效应，F=70.097,P＜0.001;蛋白质印迹结果显示，Losartan拮抗IH对vimentin（F=49.382,P=0.002）、β-catenin（F=61.919,P=0.002）、MMP2（F=14.132,P＜0.001）和p-Akt/Akt（F=100.038,P=0.013）水平有促进作用。结论 CIH通过AngⅡ-AT1R激活PI3K/Akt信号通路促进LLC细胞迁移。
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