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目的
探讨体外培养成人脂肪干细胞的相关老化机制。
方法成人脂肪干细胞来源于临床脂肪抽吸者,在干细胞培养液和恒温恒湿培养箱中连续传代培养建立老化模型。定期观察细胞形态变化,并分别进行细胞衰老相关的β-半乳糖苷酶染色、γH2AX染色和实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测。
结果脂肪干细胞体外连续培养数目倍增(PD)大于35时细胞周期停滞,进入老化期。细胞衰老相关的β-半乳糖苷酶染色和γH2AX染色呈阳性;实时定量PCR结果显示,Nanog基因和Oct4基因的表达在自我更新干细胞(PD<20)和老化脂肪干细胞(PD>35)差异有统计学意义(P<0.05)。
结论成人脂肪干细胞体外传代培养,可产生类似其在体内的老化过程,建立脂肪干细胞的老化模型,为抗衰老药物提供新的模型,为抗衰老治疗提供新的靶点,对组织工程及再生医学研究有着重要意义。