应用美兰与W-S银染法显示幽门螺杆菌的比较

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  资料与方法
  
  材料:选取20例由本院胃镜室送至的胃镜活检标本,10%福尔马林固定,石蜡包埋,切片厚度4μm,每例3张切片,分别进行常规HE、美兰、W-S银染。
  染液的配制:100ml雙蒸水中加入1g美兰粉剂,制成1%的美兰染液。W-S银染液按传统方法配制。
  染色步骤。美兰染色:①切片脱蜡至水;②滴加美兰染液,染色2~3分钟;③蒸馏水洗去染液;④自然风干后松节油或二甲苯透明,中性树胶封固。W-S银染按常规进行。
  
  结 果
  
  美兰染色:幽门螺杆菌(Hp)呈蓝色,形状弯曲或呈短棒状,位于胃黏膜表面或腺腔内,散在或呈片呈团分布。
  W-S银染法:Hp呈黑色,背景棕黄色,分布与形态同上。
  
  讨 论
  
  由于Hp为弱嗜苏木精菌,故常规HE染色中,Hp显色淡,不易观察到,因此,需要特殊染色才能清晰显示出来。
  传统W-S银染法 Hp呈黑色,若染色方法掌握稍有不当,Hp常与切片中着相同颜色的银颗粒沉淀物及黏蛋白相混淆,背景全黑Hp极难辨认,故染色时常需加阳性对照。同时W-S银染法操作步骤复杂,不易控制,染色时间长(45~60分钟),染色过程需加热,易脱片。染液配制步骤繁多,且不易保存,每次染色都需要配制新鲜染液。试剂较贵且污染环境。
  我们应用美兰染色显示Hp呈蓝色,形态结构清晰,易于辨认。基本原理:主要是通过Hp对中性美兰的吸附作用而着色。
  本组20例标本进行两种方法的染色,结果对比,Hp阳性率基本一致。实践证明,此种染色法与W-S银染法相比较,操作更为简便,易于掌握,且染色时间短(3~5分钟),显色效果稳定可靠。染液配制方法简单,易于保存,1次配制可多次使用。试剂来源方便,价格便宜且环保无污染。
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