【摘 要】
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目的探讨乙型肝炎患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)能否感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)并进行复制。方法选取137例住院患者作为研
【机 构】
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解放军疾病预防控制所全军疾病监测中心,解放军302医院临床研究管理中心,河北北方学院检验学院寄生虫教研室,
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目的探讨乙型肝炎患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)能否感染乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)并进行复制。方法选取137例住院患者作为研究对象,采集血液标本,分离提取外周血单个核细胞,使用细胞甩片法固定细胞,采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术(real-time quantitative polymerase chain reaction,QPCR)和滚环扩增结合原位跨缺口原位聚合酶链式反应技术检测HBV共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA,ccc DNA);免疫组织化学染色法检测HBV DNA和HBV ccc DNA表达。结果 137例标本中,68.6%(94/137)的标本经免疫组化染色后检测出HBV DNA的表达;83.9%(115/137)的标本原位杂交和滚环扩增PCR后检出HBV ccc DNA阳性信号;血清HBV DNA浓度高于106 copies/ml的患者PBMC中HBV ccc DNA阳性率为95.1%,低于106 copies/ml的阳性率为51.4%。结论高浓度外周血HBV DNA是HBV感染外周血单个核细胞的危险因素,通过原位聚合酶链式反应方法能够更灵敏地检测HBV DNA和ccc DNA在PBMC中的表达,为进一步研究证实PBMC感染导致HBV母婴传播途径的分子机制奠定基础。
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