【摘 要】
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探讨参莲提取物对肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导的血管内皮细胞（ECV304）损伤的干预作用及可能的作用机制。以TNF-α诱导ECV304细胞损伤模型,噻唑蓝（MTT）法检测细胞生存活力;采用流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平;生化法和酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞上清液中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）和白细胞介素-1β（IL-1β
【基金项目】
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国家“重大新药创制”科技重大专项（2017ZX09301012002）； 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项（ZXKT20026）； 国家自然科学基金项目（81673640）；
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探讨参莲提取物对肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导的血管内皮细胞（ECV304）损伤的干预作用及可能的作用机制。以TNF-α诱导ECV304细胞损伤模型,噻唑蓝（MTT）法检测细胞生存活力;采用流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平;生化法和酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞上清液中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）和白细胞介素-1β（IL-1β）含量;通过Western blot法检测Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap1）、核因子E2相关因子2（Nrf2）、醌氧化还原酶（NQO1）、血红素加氧酶1（HO-1）、半胱天冬酶3（caspase-3）、半胱天冬酶9（caspase-9）、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达水平。结果显示,与对照组相比,50μg·L-1的TNF-α能够导致ECV304细胞活力显著下降（P<0.01）,引起ECV304细胞ROS产生增加,SOD活性降低,MDA、NO、ET-1、IL-1β含量显著增加（P<0.01）,Keap1、caspase-9、Bax蛋白表达显著上调,NQO1、Bcl-2蛋白表达显著降低（P<0.05）;与模型组比较,参莲提取物可以提高ECV304细胞存活率,抑制细胞ROS产生,提高SOD活性,降低MDA、NO、ET-1、IL-1β含量（P<0.01或P<0.05）,下调Keap1、caspase-3、caspase-9、Bax蛋白表达水平,提高Nrf2、NQO1、HO-1、Bcl-2蛋白表达（P<0.01或P<0.05）。提示参莲提取物可能通过调控Nrf2/Keap1信号通路降低TNF-α诱导的ECV304细胞氧化应激损伤,减少炎症反应和细胞凋亡。
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