银杏素通过激活Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路抑制Ox-LDL诱导的血管内皮细胞铁死亡

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目的:探讨银杏素调节核转录因子E2相关因子2(Nrf2)/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路对氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的血管内皮细胞铁死亡的影响。方法:将人脐静脉细胞融合细胞EA.hy926 分为NC组(正常培养)、Ox-LDL组(50 μg/mL Ox-LDL)、银杏素低剂量组(50 μg/mL Ox-LDL+10μmol/L银杏素)、银杏素中剂量组(50 μg/mL Ox-LDL+20μmol/L银杏素)、银杏素高剂量组(50 μg/mL Ox-LDL+40μmol/L银杏素)、ML385(50 μg/mL Ox-LDL+40μmol/L银杏素+1 μmol/L的Nrf2抑制剂ML385);四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率;试剂盒检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平;特异性荧光探针法检测细胞内铁含量;2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针法和氟硼二吡咯(BODIPY)TM法检测细胞内活性氧(ROS)和脂质ROS水平;western blot检测细胞Nrf2、SLC7A11、GPX4、4-羟基壬烯酸(4-HNE)、环氧合酶2(COX2)、p53蛋白表达。结果:与NC组相比,Ox-LDL组细胞存活率、SOD含量、GSH含量、Nrf2、SLC7A11、GPX4表达明显降低(P<0.05),MDA含量、Fe2+含量、ROS、脂质ROS、4-HNE、COX2、p53表达显著升高(P<0.05);与Ox-LDL组相比,银杏素低、中、高剂量组细胞存活率、SOD含量、GSH含量、Nrf2、SLC7A11、GPX4表达明显升高(P<0.05);MDA含量、Fe2+含量、ROS、脂质ROS、4-HNE、COX2、p53表达显著降低(P<0.05);与银杏素高剂量组相比,ML385组、Erastin组、RSL3组均减弱了银杏素对Ox-LDL诱导的血管内皮细胞铁死亡的抑制作用。结论:银杏素通过激活Nrf2/SLC7A11/GPX4通路抑制Ox-LDL诱导的血管内皮细胞铁死亡。
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